CAJ | 학술논문

背景与目的:本实验室已证明蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin, sv-cystatin)具有抗肿瘤侵袭转移作用.为了进一步阐明其分子机制,本研究利用高通量的基因芯片技术探讨sv-cystatin基因转染对小鼠黑色素瘤细胞(B16F1)基因表达谱的影响.方法:分别将pcrDNA3.1/sv-cystatin及空载体pcDNA3.1转染B16Fl细胞,建立稳定转染的B16Fl/sv-cystatin及B16F1/pcDNA3.1细胞株,提取总mRNA.应用高通量的基因芯片技术检测差异表达基因,半定量RT-PCR法分别验证5个上调和5个下调的差异表达基因.结果:B16F1细胞经转染sv-cystatin后.共检测了1218个基因,其中有45个差异表达基因,21个基因表达上调(Ratio>3),24个基因表达下调(Ratio<0.5),这些基因的功能涉及细胞粘附迁移、细胞免疫调节、增殖分化与凋亡、基因转录和细胞内信号转导等方面.10个差异表达基因的RT-PCR验证结果与基因芯片分析结果相符.结论:Sv-cystatin不仅具有抑制细胞外基质的作用,而且还具有细胞免疫调节、增殖分化与凋亡、基因转录和细胞内信号转导等多种生物学功能.
배경여목적:본실험실이증명사독반광안산단백매억제제(snake venom cystatin, sv-cystatin)구유항종류침습전이작용.위료진일보천명기분자궤제,본연구이용고통량적기인심편기술탐토sv-cystatin기인전염대소서흑색소류세포(B16F1)기인표체보적영향.방법:분별장pcrDNA3.1/sv-cystatin급공재체pcDNA3.1전염B16Fl세포,건립은정전염적B16Fl/sv-cystatin급B16F1/pcDNA3.1세포주,제취총mRNA.응용고통량적기인심편기술검측차이표체기인,반정량RT-PCR법분별험증5개상조화5개하조적차이표체기인.결과:B16F1세포경전염sv-cystatin후.공검측료1218개기인,기중유45개차이표체기인,21개기인표체상조(Ratio>3),24개기인표체하조(Ratio<0.5),저사기인적공능섭급세포점부천이、세포면역조절、증식분화여조망、기인전록화세포내신호전도등방면.10개차이표체기인적RT-PCR험증결과여기인심편분석결과상부.결론:Sv-cystatin불부구유억제세포외기질적작용,이차환구유세포면역조절、증식분화여조망、기인전록화세포내신호전도등다충생물학공능.