浙江大学学报(农业与生命科学版)
浙江大學學報(農業與生命科學版)
절강대학학보(농업여생명과학판)
2009年
3期
261-265
,共5页
球孢白僵菌%昆虫模拟消化液%孢壁通透性%流式细胞术
毬孢白僵菌%昆蟲模擬消化液%孢壁通透性%流式細胞術
구포백강균%곤충모의소화액%포벽통투성%류식세포술
为了观察孢子在模拟昆虫中肠环境的变化,先配制不同组分的中肠模拟消化酶液(均为0.5%),将稳定表达绿色荧光蛋白菌株的分生孢子悬浮其中,25 ℃或35 ℃恒温孵育4 h后,分别采用流式细胞仪和扫描电子显微镜检测孢子荧光强度和孢子壁形态的变化.孢子荧光强度的改变可以反映酶液对孢子壁消解的程度.结果显示,5种模拟消化液导致荧光强度显著上升,分别为蛋白酶K、链霉蛋白酶E、纤维素酶、胰蛋白酶和α-淀粉酶,但昆布多糖酶、葡萄糖苷酶、蜗牛酶模拟消化液导致荧光强度下降.与单因素模拟消化液相比,复合酶类模拟消化液作用后的荧光强度大幅下降.在pH 5～11范围内,复合酶类模拟消化液处理后的分生孢子荧光强度变化情况差异显著.扫描电子显微镜观察到分生孢子经昆虫模拟消化液处理后孢壁表面结构发生明显变化.这意味着昆虫中肠消化液可能影响球孢白僵菌分生孢子壁结构及其侵染功能.
為瞭觀察孢子在模擬昆蟲中腸環境的變化,先配製不同組分的中腸模擬消化酶液(均為0.5%),將穩定錶達綠色熒光蛋白菌株的分生孢子懸浮其中,25 ℃或35 ℃恆溫孵育4 h後,分彆採用流式細胞儀和掃描電子顯微鏡檢測孢子熒光彊度和孢子壁形態的變化.孢子熒光彊度的改變可以反映酶液對孢子壁消解的程度.結果顯示,5種模擬消化液導緻熒光彊度顯著上升,分彆為蛋白酶K、鏈黴蛋白酶E、纖維素酶、胰蛋白酶和α-澱粉酶,但昆佈多糖酶、葡萄糖苷酶、蝸牛酶模擬消化液導緻熒光彊度下降.與單因素模擬消化液相比,複閤酶類模擬消化液作用後的熒光彊度大幅下降.在pH 5～11範圍內,複閤酶類模擬消化液處理後的分生孢子熒光彊度變化情況差異顯著.掃描電子顯微鏡觀察到分生孢子經昆蟲模擬消化液處理後孢壁錶麵結構髮生明顯變化.這意味著昆蟲中腸消化液可能影響毬孢白僵菌分生孢子壁結構及其侵染功能.
위료관찰포자재모의곤충중장배경적변화,선배제불동조분적중장모의소화매액(균위0.5%),장은정표체록색형광단백균주적분생포자현부기중,25 ℃혹35 ℃항온부육4 h후,분별채용류식세포의화소묘전자현미경검측포자형광강도화포자벽형태적변화.포자형광강도적개변가이반영매액대포자벽소해적정도.결과현시,5충모의소화액도치형광강도현저상승,분별위단백매K、련매단백매E、섬유소매、이단백매화α-정분매,단곤포다당매、포도당감매、와우매모의소화액도치형광강도하강.여단인소모의소화액상비,복합매류모의소화액작용후적형광강도대폭하강.재pH 5～11범위내,복합매류모의소화액처리후적분생포자형광강도변화정황차이현저.소묘전자현미경관찰도분생포자경곤충모의소화액처리후포벽표면결구발생명현변화.저의미착곤충중장소화액가능영향구포백강균분생포자벽결구급기침염공능.
