CAJ | 학술논문

通过PCR扩增出猪圆环病毒2(PCV-2)3个亚群(1A、1B、1C)毒株的全基因组DNA序列,并分别克隆入pMD-18T载体,获得含有PCV-2全基因组的3个重组质粒,分别命名为RP8(1A)、P0(1B)和P4-1(1C).将3个重组质粒分别用SacⅡ切出1767 bp的PCV-2全基因组,并在体外分别用T4连接酶连接而环化.用脂质体将3种自身环化的基因组转染无PCV-1污染的PK-15细胞,并按常规病毒培养方法分别传代,第5代细胞培养物分别用间接免疫荧光试验(IFA)及PCR方法检测转染的细胞,检测结果均为阳性,说明已获得PCV-2共3个亚群1A、1B、1C的感染性克隆.用1A、1B、1C感染性克隆的第5代细胞培养物分别接种小鼠,可在接种小鼠的血液中分别检测到相应PCV-2亚型的基因组DNA,表明本试验构建的自身环化的1A、1B、1C亚型的PCV-2的全基因组DNA在体内、体外均具有感染性.
통과PCR확증출저원배병독2(PCV-2)3개아군(1A、1B、1C)독주적전기인조DNA서렬,병분별극륭입pMD-18T재체,획득함유PCV-2전기인조적3개중조질립,분별명명위RP8(1A)、P0(1B)화P4-1(1C).장3개중조질립분별용SacⅡ절출1767 bp적PCV-2전기인조,병재체외분별용T4련접매련접이배화.용지질체장3충자신배화적기인조전염무PCV-1오염적PK-15세포,병안상규병독배양방법분별전대,제5대세포배양물분별용간접면역형광시험(IFA)급PCR방법검측전염적세포,검측결과균위양성,설명이획득PCV-2공3개아군1A、1B、1C적감염성극륭.용1A、1B、1C감염성극륭적제5대세포배양물분별접충소서,가재접충소서적혈액중분별검측도상응PCV-2아형적기인조DNA,표명본시험구건적자신배화적1A、1B、1C아형적PCV-2적전기인조DNA재체내、체외균구유감염성.