CAJ | 학술논문

目的研究CVB3损伤HeLa细胞高尔基体结构的机制,为进一步探讨CVB3的致病机制奠定基础.方法采用MOI为5的CVB3感染HeLa细胞,免疫荧光双标法检测病毒感染后不同时间点VP1和GM130在细胞中的定位情况,观察细胞高尔基带的变化;同时,选择CVB3感染后不同时间点收集细胞,Bradford法蛋白定量后.Western blot测定VP1、GM130和GRASP65蛋白的表达变化.结果正常HeLa细胞中GM130和GRASP65免疫荧光呈带状分布,高尔基体结构正常;而CVB3病毒感染HeLa细胞3h后,GM130的荧光呈现散点状分布,高尔基体结构损伤.与此同时,GM130和GRASP65蛋白表达量逐渐下降;而VP1蛋白表达量持续上升,且6h后一直维持在较高水平.结论 CVB3感染引起HeLa细胞蛋白GM130和GRASP65表达量下调,导致GM130和GRASP65荧光带弥散,高尔基带断裂,这可能是CVB3感染导致宿主细胞高尔基体结构损伤的机制之一.
목적 연구CVB3손상HeLa세포고이기체결구적궤제,위진일보탐토CVB3적치병궤제전정기출.방법 채용MOI위5적CVB3감염HeLa세포,면역형광쌍표법검측병독감염후불동시간점VP1화GM130재세포중적정위정황,관찰세포고이기대적변화;동시,선택CVB3감염후불동시간점수집세포,Bradford법단백정량후.Western blot측정VP1、GM130화GRASP65단백적표체변화.결과 정상HeLa세포중GM130화GRASP65면역형광정대상분포,고이기체결구정상;이CVB3병독감염HeLa세포3h후,GM130적형광정현산점상분포,고이기체결구손상.여차동시,GM130화GRASP65단백표체량축점하강;이VP1단백표체량지속상승,차6h후일직유지재교고수평.결론 CVB3감염인기HeLa세포단백GM130화GRASP65표체량하조,도치GM130화GRASP65형광대미산,고이기대단렬,저가능시CVB3감염도치숙주세포고이기체결구손상적궤제지일.