CAJ | 학술논문

目的:探讨同种异体椎间盘复合髓核细胞移植的转归,观察转人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因髓核细胞介入椎间盘移植的生物学效应.方法:常规分离8周龄比格犬髓核细胞,将PKH-26标记的传2代髓核细胞(NPc)和转hTERT基因髓核细胞(hTERT-NPc)分别注射入冷冻保存的同种异体椎间盘内构建组织工程化同种异体椎间盘.选择12月龄同种犬18只随机分为3组,分别植入hTERT-NPc组织工程化的同种异体椎间盘(A组)、NPc组织工程化的同种异体椎间盘(B组)以及未组织工程化的同种异体椎间盘(C组).每只犬于术后4、8、12周行正侧位X线片及MRI检查,观察移植椎间盘同宿主椎体愈合情况、移植椎间盘高度和信号变化情况；手术后12周麻醉状态下处死实验动物取L1 ～L7段脊柱标本进行生物力学测试,取移植椎间盘进行组织学观察.结果:X线及MRI检查结果显示3组移植椎间盘与宿主椎体均实现了良好的骨性融合,其中C组椎间盘术后出现了呈进展趋势的退行性改变,至移植后12周,其椎间盘高度及髓核信号比灰度值明显低于A、B两组(P＜0.05).生物力学显示术后12周时,C组移植椎间盘在屈伸和旋转方向的活动度显著性大于A、B两组(P＜0.05),A组与B组无显著性差异(P＞0.05).激光共聚焦显微镜观察到A、B组移植椎间盘髓核区域内有红色荧光细胞；光学显微镜下观察A、B两组移植椎间盘结构保持较好,外形类似软骨细胞的髓核细胞数量较多,排列较为规则；C组髓核形态保持欠佳,结构较为紊乱,髓核细胞数量明显减少,细胞形态欠饱满,退行性改变明显.RT-PCR分析显示术后12周时A组髓核内可检测到hTERTmRNA的阳性表达.结论:犬同种异体椎间盘移植后可在宿主体内存活,通过复合NPc可延缓椎间盘移植后的退行性改变；hTERT-NPc介入具有更好的保持异体椎间盘功能的潜力,有望保证同种异体椎间盘移植的远期疗效. 目的:探討同種異體椎間盤複閤髓覈細胞移植的轉歸,觀察轉人耑粒酶逆轉錄酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因髓覈細胞介入椎間盤移植的生物學效應.方法:常規分離8週齡比格犬髓覈細胞,將PKH-26標記的傳2代髓覈細胞(NPc)和轉hTERT基因髓覈細胞(hTERT-NPc)分彆註射入冷凍保存的同種異體椎間盤內構建組織工程化同種異體椎間盤.選擇12月齡同種犬18隻隨機分為3組,分彆植入hTERT-NPc組織工程化的同種異體椎間盤(A組)、NPc組織工程化的同種異體椎間盤(B組)以及未組織工程化的同種異體椎間盤(C組).每隻犬于術後4、8、12週行正側位X線片及MRI檢查,觀察移植椎間盤同宿主椎體愈閤情況、移植椎間盤高度和信號變化情況；手術後12週痳醉狀態下處死實驗動物取L1 ～L7段脊柱標本進行生物力學測試,取移植椎間盤進行組織學觀察.結果:X線及MRI檢查結果顯示3組移植椎間盤與宿主椎體均實現瞭良好的骨性融閤,其中C組椎間盤術後齣現瞭呈進展趨勢的退行性改變,至移植後12週,其椎間盤高度及髓覈信號比灰度值明顯低于A、B兩組(P＜0.05).生物力學顯示術後12週時,C組移植椎間盤在屈伸和鏇轉方嚮的活動度顯著性大于A、B兩組(P＜0.05),A組與B組無顯著性差異(P＞0.05).激光共聚焦顯微鏡觀察到A、B組移植椎間盤髓覈區域內有紅色熒光細胞；光學顯微鏡下觀察A、B兩組移植椎間盤結構保持較好,外形類似軟骨細胞的髓覈細胞數量較多,排列較為規則；C組髓覈形態保持欠佳,結構較為紊亂,髓覈細胞數量明顯減少,細胞形態欠飽滿,退行性改變明顯.RT-PCR分析顯示術後12週時A組髓覈內可檢測到hTERTmRNA的暘性錶達.結論:犬同種異體椎間盤移植後可在宿主體內存活,通過複閤NPc可延緩椎間盤移植後的退行性改變；hTERT-NPc介入具有更好的保持異體椎間盤功能的潛力,有望保證同種異體椎間盤移植的遠期療效.
목적:탐토동충이체추간반복합수핵세포이식적전귀,관찰전인단립매역전록매(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)기인수핵세포개입추간반이식적생물학효응.방법:상규분리8주령비격견수핵세포,장PKH-26표기적전2대수핵세포(NPc)화전hTERT기인수핵세포(hTERT-NPc)분별주사입냉동보존적동충이체추간반내구건조직공정화동충이체추간반.선택12월령동충견18지수궤분위3조,분별식입hTERT-NPc조직공정화적동충이체추간반(A조)、NPc조직공정화적동충이체추간반(B조)이급미조직공정화적동충이체추간반(C조).매지견우술후4、8、12주행정측위X선편급MRI검사,관찰이식추간반동숙주추체유합정황、이식추간반고도화신호변화정황；수술후12주마취상태하처사실험동물취L1 ～L7단척주표본진행생물역학측시,취이식추간반진행조직학관찰.결과:X선급MRI검사결과현시3조이식추간반여숙주추체균실현료량호적골성융합,기중C조추간반술후출현료정진전추세적퇴행성개변,지이식후12주,기추간반고도급수핵신호비회도치명현저우A、B량조(P＜0.05).생물역학현시술후12주시,C조이식추간반재굴신화선전방향적활동도현저성대우A、B량조(P＜0.05),A조여B조무현저성차이(P＞0.05).격광공취초현미경관찰도A、B조이식추간반수핵구역내유홍색형광세포；광학현미경하관찰A、B량조이식추간반결구보지교호,외형유사연골세포적수핵세포수량교다,배렬교위규칙；C조수핵형태보지흠가,결구교위문란,수핵세포수량명현감소,세포형태흠포만,퇴행성개변명현.RT-PCR분석현시술후12주시A조수핵내가검측도hTERTmRNA적양성표체.결론:견동충이체추간반이식후가재숙주체내존활,통과복합NPc가연완추간반이식후적퇴행성개변；hTERT-NPc개입구유경호적보지이체추간반공능적잠력,유망보증동충이체추간반이식적원기료효.