军医进修学院学报
軍醫進脩學院學報
군의진수학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
2011年
11期
1139-1141
,共3页
姚文芳%崔忻%田磊%高宇红%洪权%薛毅珑
姚文芳%崔忻%田磊%高宇紅%洪權%薛毅瓏
요문방%최흔%전뢰%고우홍%홍권%설의롱
永生化%正常成人肝细胞%逆转录病毒%自杀基因
永生化%正常成人肝細胞%逆轉錄病毒%自殺基因
영생화%정상성인간세포%역전록병독%자살기인
目的 构建永生化正常成人肝细胞为生物型人工肝提供安全有效的人肝细胞源.方法 转染包装细胞,获得逆转录病毒；将该病毒感染正常成人肝细胞HL-7702；更昔洛韦毒性实验检测转染后肝细胞内HSV-tk基因；RT-PCR法检测转染后细胞内SV40T的mRNA；Western Blot法和免疫荧光染色检测转染后细胞内SV40T基因的蛋白表达.结果 更昔洛韦检测转染后的肝细胞存活良好,而转染前的肝细胞死亡.RT-PCR法显示转染后的肝细胞内存在SV40T mRNA；Western Blot 法和免疫荧光染色法显示转染后肝细胞内存在SV40T蛋白.结论 转染后的正常成人肝细胞中含有SV40T和HSV-tk基因,并表达相关蛋白.
目的 構建永生化正常成人肝細胞為生物型人工肝提供安全有效的人肝細胞源.方法 轉染包裝細胞,穫得逆轉錄病毒；將該病毒感染正常成人肝細胞HL-7702；更昔洛韋毒性實驗檢測轉染後肝細胞內HSV-tk基因；RT-PCR法檢測轉染後細胞內SV40T的mRNA；Western Blot法和免疫熒光染色檢測轉染後細胞內SV40T基因的蛋白錶達.結果 更昔洛韋檢測轉染後的肝細胞存活良好,而轉染前的肝細胞死亡.RT-PCR法顯示轉染後的肝細胞內存在SV40T mRNA；Western Blot 法和免疫熒光染色法顯示轉染後肝細胞內存在SV40T蛋白.結論 轉染後的正常成人肝細胞中含有SV40T和HSV-tk基因,併錶達相關蛋白.
목적 구건영생화정상성인간세포위생물형인공간제공안전유효적인간세포원.방법 전염포장세포,획득역전록병독；장해병독감염정상성인간세포HL-7702；경석락위독성실험검측전염후간세포내HSV-tk기인；RT-PCR법검측전염후세포내SV40T적mRNA；Western Blot법화면역형광염색검측전염후세포내SV40T기인적단백표체.결과 경석락위검측전염후적간세포존활량호,이전염전적간세포사망.RT-PCR법현시전염후적간세포내존재SV40T mRNA；Western Blot 법화면역형광염색법현시전염후간세포내존재SV40T단백.결론 전염후적정상성인간세포중함유SV40T화HSV-tk기인,병표체상관단백.
