中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2011年
6期
1388-1392
,共5页
王利芳%黄闪%黄纯%李春蕊%李登举
王利芳%黃閃%黃純%李春蕊%李登舉
왕리방%황섬%황순%리춘예%리등거
DNA结合抑制因子4%K562细胞系%5-氮杂-2’-脱氧胞苷%细胞周期%细胞凋亡
DNA結閤抑製因子4%K562細胞繫%5-氮雜-2’-脫氧胞苷%細胞週期%細胞凋亡
DNA결합억제인자4%K562세포계%5-담잡-2’-탈양포감%세포주기%세포조망
本研究探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人慢性髓系白血病(CML)急红变细胞系K562细胞生物学活性和DNA结合抑制因子4(ID4)基因表达的影响,探寻白血病基因治疗的新靶点.应用甲基化特异性PCR方法检测K562细胞中ID4基因甲基化情况;实时荧光定量PCR检测5-Aza-CdR处理K562细胞后ID4 mRNA的表达水平;流式细胞术分析5 -Aza-CdR处理后细胞凋亡率和细胞周期的变化.结果表明,K562细胞中存在ID4基因的甲基化;5-Aza-CdR处理后K562细胞ID4 mRNA表达增加,并具有浓度依赖性,不同浓度药物处理组之间差异具有统计学意义(p＜0.01).5 -Aza-CdR可使K562细胞凋亡率增加,并且作用呈时间剂量依赖性.且细胞凋亡率与ID4 mRNA的相对表达水平呈高度相关(r=0.95).5-Aza-CdR处理K562细胞48小时后,随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞逐渐增多,G2/M期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0/G1期.结论:甲基化转移酶抑制剂5-Aza-CdR 能促使CML急红变细胞系K562细胞中沉默的ID4基因重新表达,可能进而参与K562细胞凋亡和细胞周期阻滞的调控.
本研究探討5-氮雜-2’-脫氧胞苷(5-Aza-CdR)對人慢性髓繫白血病(CML)急紅變細胞繫K562細胞生物學活性和DNA結閤抑製因子4(ID4)基因錶達的影響,探尋白血病基因治療的新靶點.應用甲基化特異性PCR方法檢測K562細胞中ID4基因甲基化情況;實時熒光定量PCR檢測5-Aza-CdR處理K562細胞後ID4 mRNA的錶達水平;流式細胞術分析5 -Aza-CdR處理後細胞凋亡率和細胞週期的變化.結果錶明,K562細胞中存在ID4基因的甲基化;5-Aza-CdR處理後K562細胞ID4 mRNA錶達增加,併具有濃度依賴性,不同濃度藥物處理組之間差異具有統計學意義(p＜0.01).5 -Aza-CdR可使K562細胞凋亡率增加,併且作用呈時間劑量依賴性.且細胞凋亡率與ID4 mRNA的相對錶達水平呈高度相關(r=0.95).5-Aza-CdR處理K562細胞48小時後,隨著藥物濃度的增加,G0/G1期細胞逐漸增多,G2/M期細胞逐漸減少,細胞阻滯在G0/G1期.結論:甲基化轉移酶抑製劑5-Aza-CdR 能促使CML急紅變細胞繫K562細胞中沉默的ID4基因重新錶達,可能進而參與K562細胞凋亡和細胞週期阻滯的調控.
본연구탐토5-담잡-2’-탈양포감(5-Aza-CdR)대인만성수계백혈병(CML)급홍변세포계K562세포생물학활성화DNA결합억제인자4(ID4)기인표체적영향,탐심백혈병기인치료적신파점.응용갑기화특이성PCR방법검측K562세포중ID4기인갑기화정황;실시형광정량PCR검측5-Aza-CdR처리K562세포후ID4 mRNA적표체수평;류식세포술분석5 -Aza-CdR처리후세포조망솔화세포주기적변화.결과표명,K562세포중존재ID4기인적갑기화;5-Aza-CdR처리후K562세포ID4 mRNA표체증가,병구유농도의뢰성,불동농도약물처리조지간차이구유통계학의의(p＜0.01).5 -Aza-CdR가사K562세포조망솔증가,병차작용정시간제량의뢰성.차세포조망솔여ID4 mRNA적상대표체수평정고도상관(r=0.95).5-Aza-CdR처리K562세포48소시후,수착약물농도적증가,G0/G1기세포축점증다,G2/M기세포축점감소,세포조체재G0/G1기.결론:갑기화전이매억제제5-Aza-CdR 능촉사CML급홍변세포계K562세포중침묵적ID4기인중신표체,가능진이삼여K562세포조망화세포주기조체적조공.
