中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2012年
1期
75-81
,共7页
陈立曙%宋敏%朱志宏%陈慎仁
陳立曙%宋敏%硃誌宏%陳慎仁
진립서%송민%주지굉%진신인
受体%胰岛素%SIRT1%Insulin/IGF-1%通路
受體%胰島素%SIRT1%Insulin/IGF-1%通路
수체%이도소%SIRT1%Insulin/IGF-1%통로
目的 本研究主要是从近年备受关注的SIRT1 基因与胰岛素/胰岛素样生长因子-1(insulin/IGF-1)信号通路的调控关系中探讨SIRT1 对胰岛素受体(INSR)表达的影响,在基因水平上探讨胰岛素抵抗发生发展的相关机制.方法 本实验采用国际公认的前脂肪细胞系3T3-L1 细胞为研究对象,在一定条件下将其诱导其分化,经油红O 染色鉴定为分化成熟的脂肪细胞.用Ad-mSirt1-IRES-eGFP 腺病毒转染脂肪细胞,使其SIRT1 基因高表达,用Q-PCR、Western blot、免疫荧光等实验方法,检测SIRT1 和INSR 基因及蛋白的表达情况并与空白对照组比较.结果 (1)3T3-L1 细胞经诱导后可分化为成熟脂肪细胞;(2)Q-PCR 结果显示,与对照组相比,转染组SIRT1 基因转录及蛋白表达均明显上调;(3)Western blot 及免疫荧光细胞化学染色结果均显示,与对照组相比,转染组(SIRT1 高表达组)INSR 蛋白表达明显增加.结论 SIRT1 基因可影响脂肪细胞Insulin/IGF-1 信号通路中最上游基因INSR 的表达,SIRT1 基因在胰岛素抵抗的发生发展中的作用机制复杂而且重要.
目的 本研究主要是從近年備受關註的SIRT1 基因與胰島素/胰島素樣生長因子-1(insulin/IGF-1)信號通路的調控關繫中探討SIRT1 對胰島素受體(INSR)錶達的影響,在基因水平上探討胰島素牴抗髮生髮展的相關機製.方法 本實驗採用國際公認的前脂肪細胞繫3T3-L1 細胞為研究對象,在一定條件下將其誘導其分化,經油紅O 染色鑒定為分化成熟的脂肪細胞.用Ad-mSirt1-IRES-eGFP 腺病毒轉染脂肪細胞,使其SIRT1 基因高錶達,用Q-PCR、Western blot、免疫熒光等實驗方法,檢測SIRT1 和INSR 基因及蛋白的錶達情況併與空白對照組比較.結果 (1)3T3-L1 細胞經誘導後可分化為成熟脂肪細胞;(2)Q-PCR 結果顯示,與對照組相比,轉染組SIRT1 基因轉錄及蛋白錶達均明顯上調;(3)Western blot 及免疫熒光細胞化學染色結果均顯示,與對照組相比,轉染組(SIRT1 高錶達組)INSR 蛋白錶達明顯增加.結論 SIRT1 基因可影響脂肪細胞Insulin/IGF-1 信號通路中最上遊基因INSR 的錶達,SIRT1 基因在胰島素牴抗的髮生髮展中的作用機製複雜而且重要.
목적 본연구주요시종근년비수관주적SIRT1 기인여이도소/이도소양생장인자-1(insulin/IGF-1)신호통로적조공관계중탐토SIRT1 대이도소수체(INSR)표체적영향,재기인수평상탐토이도소저항발생발전적상관궤제.방법 본실험채용국제공인적전지방세포계3T3-L1 세포위연구대상,재일정조건하장기유도기분화,경유홍O 염색감정위분화성숙적지방세포.용Ad-mSirt1-IRES-eGFP 선병독전염지방세포,사기SIRT1 기인고표체,용Q-PCR、Western blot、면역형광등실험방법,검측SIRT1 화INSR 기인급단백적표체정황병여공백대조조비교.결과 (1)3T3-L1 세포경유도후가분화위성숙지방세포;(2)Q-PCR 결과현시,여대조조상비,전염조SIRT1 기인전록급단백표체균명현상조;(3)Western blot 급면역형광세포화학염색결과균현시,여대조조상비,전염조(SIRT1 고표체조)INSR 단백표체명현증가.결론 SIRT1 기인가영향지방세포Insulin/IGF-1 신호통로중최상유기인INSR 적표체,SIRT1 기인재이도소저항적발생발전중적작용궤제복잡이차중요.
