中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2003年
7期
522-528
,共7页
梁未丽%阚飙%于凤刚%祁国明%刘延清%高守一
樑未麗%闞飆%于鳳剛%祁國明%劉延清%高守一
량미려%감표%우봉강%기국명%류연청%고수일
霍乱弧菌%口服活疫苗%免疫原性%质粒-染色体致死平衡系统
霍亂弧菌%口服活疫苗%免疫原性%質粒-染色體緻死平衡繫統
곽란호균%구복활역묘%면역원성%질립-염색체치사평형계통
目的构建能够诱导抗菌抗毒素免疫和抵抗CTXΦ转染的霍乱弧菌生物安全性口服活疫苗候选株. 方法以不产毒的El Tor型霍乱弧菌疫苗候选株IEM101为出发菌株,以管家基因thyA为选择压力,在IEM101的thyA基因缺失株IEM101-T中,通过质粒-染色体致死平衡系统表达霍乱毒素B亚单位基因ctxB和介导CTXΦ噬菌体免疫的rstR基因.在家兔模型中,通过检测血清杀弧菌抗体和抗CTB的IgG抗体来评价该新建疫苗候选株的免疫原性;以对家兔攻毒试验后肠段积液量来评价其保护力. 结果含ctxB、rstR和大肠杆菌来源的thyA基因的重组质粒在IEM101-T中稳定存在,GM1-ELISA 检测ctxB基因能够很好表达.动物试验表明,该新建疫苗候选株能刺激机体产生高滴度的血清杀弧菌抗体和抗CTB IgG抗体,能较好抵抗至少4μg纯品CT和不同毒株的攻击. 结论应用质粒-染色体致死平衡系统构建了能抵抗CTXΦ转染和稳定表达ctxB的生物安全性抗菌抗毒口服活疫苗候选株,其在家兔模型中有较好的免疫原性和保护力.
目的構建能夠誘導抗菌抗毒素免疫和牴抗CTXΦ轉染的霍亂弧菌生物安全性口服活疫苗候選株. 方法以不產毒的El Tor型霍亂弧菌疫苗候選株IEM101為齣髮菌株,以管傢基因thyA為選擇壓力,在IEM101的thyA基因缺失株IEM101-T中,通過質粒-染色體緻死平衡繫統錶達霍亂毒素B亞單位基因ctxB和介導CTXΦ噬菌體免疫的rstR基因.在傢兔模型中,通過檢測血清殺弧菌抗體和抗CTB的IgG抗體來評價該新建疫苗候選株的免疫原性;以對傢兔攻毒試驗後腸段積液量來評價其保護力. 結果含ctxB、rstR和大腸桿菌來源的thyA基因的重組質粒在IEM101-T中穩定存在,GM1-ELISA 檢測ctxB基因能夠很好錶達.動物試驗錶明,該新建疫苗候選株能刺激機體產生高滴度的血清殺弧菌抗體和抗CTB IgG抗體,能較好牴抗至少4μg純品CT和不同毒株的攻擊. 結論應用質粒-染色體緻死平衡繫統構建瞭能牴抗CTXΦ轉染和穩定錶達ctxB的生物安全性抗菌抗毒口服活疫苗候選株,其在傢兔模型中有較好的免疫原性和保護力.
목적구건능구유도항균항독소면역화저항CTXΦ전염적곽란호균생물안전성구복활역묘후선주. 방법이불산독적El Tor형곽란호균역묘후선주IEM101위출발균주,이관가기인thyA위선택압력,재IEM101적thyA기인결실주IEM101-T중,통과질립-염색체치사평형계통표체곽란독소B아단위기인ctxB화개도CTXΦ서균체면역적rstR기인.재가토모형중,통과검측혈청살호균항체화항CTB적IgG항체래평개해신건역묘후선주적면역원성;이대가토공독시험후장단적액량래평개기보호력. 결과함ctxB、rstR화대장간균래원적thyA기인적중조질립재IEM101-T중은정존재,GM1-ELISA 검측ctxB기인능구흔호표체.동물시험표명,해신건역묘후선주능자격궤체산생고적도적혈청살호균항체화항CTB IgG항체,능교호저항지소4μg순품CT화불동독주적공격. 결론응용질립-염색체치사평형계통구건료능저항CTXΦ전염화은정표체ctxB적생물안전성항균항독구복활역묘후선주,기재가토모형중유교호적면역원성화보호력.
