中华医学遗传学杂志
中華醫學遺傳學雜誌
중화의학유전학잡지
CHINESE JOURNAL OF MEDICAL GENETICS
2003年
2期
147-150
,共4页
肖艳萍%陈美珏%盛敏%杨华%黄淑帧
肖豔萍%陳美玨%盛敏%楊華%黃淑幀
초염평%진미각%성민%양화%황숙정
间期荧光原位杂交%造血干细胞%人%山羊%嵌合模型
間期熒光原位雜交%造血榦細胞%人%山羊%嵌閤模型
간기형광원위잡교%조혈간세포%인%산양%감합모형
目的建立一种高度灵敏特异的间期荧光原位杂交(interphase fluorescence in situ hybridization, IFISH)技术,以检测人/山羊嵌合模型中低比例的人细胞.方法采用人特异Y染色体卫星DNA探针CEPY和17号染色体卫星DNA探针p17H8对两头移植人男性造血干细胞(hematopoietic stem cell, HSC)的人/山羊嵌合模型、1头正常阴性山羊和1名正常人男性的外周血进行IFISH分析.为评价FISH检测效率的正确性,将正常人男性与正常阴性山羊细胞按1/100、1/500和1/1000混合进行IFISH分析.并确定一套信号计数规则,以保证方法稳定可靠.结果人/山羊混合细胞中人细胞阳性率与原比例相近.人细胞阳性率平均值为正常人男性98.60%(CEPY)和100.00%(p17H8)、正常阴性山羊为0、人/山羊嵌合模型为0.23%(CEPY)和0.11%(p17H8).结果表明人/山羊嵌合模型中有低比例的人细胞存在,且为男性细胞.结论本研究建立的IFISH技术高度灵敏特异,能真实反映检测细胞的比例,为人/山羊嵌合模型中低比例的人细胞检测提供了直观、灵敏、特异的途径.
目的建立一種高度靈敏特異的間期熒光原位雜交(interphase fluorescence in situ hybridization, IFISH)技術,以檢測人/山羊嵌閤模型中低比例的人細胞.方法採用人特異Y染色體衛星DNA探針CEPY和17號染色體衛星DNA探針p17H8對兩頭移植人男性造血榦細胞(hematopoietic stem cell, HSC)的人/山羊嵌閤模型、1頭正常陰性山羊和1名正常人男性的外週血進行IFISH分析.為評價FISH檢測效率的正確性,將正常人男性與正常陰性山羊細胞按1/100、1/500和1/1000混閤進行IFISH分析.併確定一套信號計數規則,以保證方法穩定可靠.結果人/山羊混閤細胞中人細胞暘性率與原比例相近.人細胞暘性率平均值為正常人男性98.60%(CEPY)和100.00%(p17H8)、正常陰性山羊為0、人/山羊嵌閤模型為0.23%(CEPY)和0.11%(p17H8).結果錶明人/山羊嵌閤模型中有低比例的人細胞存在,且為男性細胞.結論本研究建立的IFISH技術高度靈敏特異,能真實反映檢測細胞的比例,為人/山羊嵌閤模型中低比例的人細胞檢測提供瞭直觀、靈敏、特異的途徑.
목적건립일충고도령민특이적간기형광원위잡교(interphase fluorescence in situ hybridization, IFISH)기술,이검측인/산양감합모형중저비례적인세포.방법채용인특이Y염색체위성DNA탐침CEPY화17호염색체위성DNA탐침p17H8대량두이식인남성조혈간세포(hematopoietic stem cell, HSC)적인/산양감합모형、1두정상음성산양화1명정상인남성적외주혈진행IFISH분석.위평개FISH검측효솔적정학성,장정상인남성여정상음성산양세포안1/100、1/500화1/1000혼합진행IFISH분석.병학정일투신호계수규칙,이보증방법은정가고.결과인/산양혼합세포중인세포양성솔여원비례상근.인세포양성솔평균치위정상인남성98.60%(CEPY)화100.00%(p17H8)、정상음성산양위0、인/산양감합모형위0.23%(CEPY)화0.11%(p17H8).결과표명인/산양감합모형중유저비례적인세포존재,차위남성세포.결론본연구건립적IFISH기술고도령민특이,능진실반영검측세포적비례,위인/산양감합모형중저비례적인세포검측제공료직관、령민、특이적도경.
