江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
5期
1163-1167
,共5页
王秀宇%林凡云%吴季荣%曹欢%史建荣
王秀宇%林凡雲%吳季榮%曹歡%史建榮
왕수우%림범운%오계영%조환%사건영
转基因小麦%镰刀菌%实时荧光定量PCR%绝对定量
轉基因小麥%鐮刀菌%實時熒光定量PCR%絕對定量
전기인소맥%렴도균%실시형광정량PCR%절대정량
对转基因抗病小麦根际土壤中镰刀菌含量进行绝对定量,建立了实时荧光定量PCR(Real-time QPCR)检测体系.应用该反应体系,对转基因小麦各个生长时期的镰刀菌拷贝数进行绝对定量.结果表明,镰刀菌通用引物具有较好的特异性;Real-time QPCR反应的扩增曲线中各梯度标准质粒的循环阈值间隔均匀,溶解曲线峰值较突出,该标准曲线的相关系数(r)=0.99920,斜率为-3.203,计算其扩增效率为105％,符合荧光定量PCR方法中对各项指标的要求.应用试验结果表明,在转基因小麦的播种前期、灌浆期、成熟期镰刀菌数量较低,在苗期、返青期、拔节期镰刀菌数量较高.
對轉基因抗病小麥根際土壤中鐮刀菌含量進行絕對定量,建立瞭實時熒光定量PCR(Real-time QPCR)檢測體繫.應用該反應體繫,對轉基因小麥各箇生長時期的鐮刀菌拷貝數進行絕對定量.結果錶明,鐮刀菌通用引物具有較好的特異性;Real-time QPCR反應的擴增麯線中各梯度標準質粒的循環閾值間隔均勻,溶解麯線峰值較突齣,該標準麯線的相關繫數(r)=0.99920,斜率為-3.203,計算其擴增效率為105％,符閤熒光定量PCR方法中對各項指標的要求.應用試驗結果錶明,在轉基因小麥的播種前期、灌漿期、成熟期鐮刀菌數量較低,在苗期、返青期、拔節期鐮刀菌數量較高.
대전기인항병소맥근제토양중렴도균함량진행절대정량,건립료실시형광정량PCR(Real-time QPCR)검측체계.응용해반응체계,대전기인소맥각개생장시기적렴도균고패수진행절대정량.결과표명,렴도균통용인물구유교호적특이성;Real-time QPCR반응적확증곡선중각제도표준질립적순배역치간격균균,용해곡선봉치교돌출,해표준곡선적상관계수(r)=0.99920,사솔위-3.203,계산기확증효솔위105％,부합형광정량PCR방법중대각항지표적요구.응용시험결과표명,재전기인소맥적파충전기、관장기、성숙기렴도균수량교저,재묘기、반청기、발절기렴도균수량교고.
