国际呼吸杂志
國際呼吸雜誌
국제호흡잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF RESPIRATION
2007年
19期
1441-1443
,共3页
唐宇龙%丁元生%杨华%毕爱笑%秦莲花%郑瑞娟%胡忠义
唐宇龍%丁元生%楊華%畢愛笑%秦蓮花%鄭瑞娟%鬍忠義
당우룡%정원생%양화%필애소%진연화%정서연%호충의
结核分枝杆菌%MPT64%克隆%表达
結覈分枝桿菌%MPT64%剋隆%錶達
결핵분지간균%MPT64%극륭%표체
目的 构建结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64原核表达载体并进行表达和纯化.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增出MPT64基因,产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化,酶切鉴定,克隆到pET21a原核表达载体,测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠杆菌BL21,诱导表达MPT64融合蛋白,利用亲和层析纯化表达产物,SDS-PAGE电泳进行鉴定.结果 成功构建MPT64表达载体,SDS-PAGE电泳鉴定成功表达MPT64蛋白.并以此蛋白进行结核抗体的检测,其特异性和敏感性分别为96%和43%.结论 成功表达结核分枝杆菌MPT64蛋白,并进行特异性和敏感性的检测,证明重组的MPT64蛋白有希望成为结核病血清学诊断的组合抗原的候选者之一.
目的 構建結覈分枝桿菌分泌蛋白MPT64原覈錶達載體併進行錶達和純化.方法 以結覈分枝桿菌標準株H37Rv基因組DNA為模闆擴增齣MPT64基因,產物經純化迴收後與載體pMD-T連接轉化,酶切鑒定,剋隆到pET21a原覈錶達載體,測序鑒定插入序列完全正確者轉化大腸桿菌BL21,誘導錶達MPT64融閤蛋白,利用親和層析純化錶達產物,SDS-PAGE電泳進行鑒定.結果 成功構建MPT64錶達載體,SDS-PAGE電泳鑒定成功錶達MPT64蛋白.併以此蛋白進行結覈抗體的檢測,其特異性和敏感性分彆為96%和43%.結論 成功錶達結覈分枝桿菌MPT64蛋白,併進行特異性和敏感性的檢測,證明重組的MPT64蛋白有希望成為結覈病血清學診斷的組閤抗原的候選者之一.
목적 구건결핵분지간균분비단백MPT64원핵표체재체병진행표체화순화.방법 이결핵분지간균표준주H37Rv기인조DNA위모판확증출MPT64기인,산물경순화회수후여재체pMD-T련접전화,매절감정,극륭도pET21a원핵표체재체,측서감정삽입서렬완전정학자전화대장간균BL21,유도표체MPT64융합단백,이용친화층석순화표체산물,SDS-PAGE전영진행감정.결과 성공구건MPT64표체재체,SDS-PAGE전영감정성공표체MPT64단백.병이차단백진행결핵항체적검측,기특이성화민감성분별위96%화43%.결론 성공표체결핵분지간균MPT64단백,병진행특이성화민감성적검측,증명중조적MPT64단백유희망성위결핵병혈청학진단적조합항원적후선자지일.
