农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
8期
928-935
,共8页
刘剑飞%吴明明%蒋亚军%迟晓瑶%曹月胜%张廷荣%孙金海
劉劍飛%吳明明%蔣亞軍%遲曉瑤%曹月勝%張廷榮%孫金海
류검비%오명명%장아군%지효요%조월성%장정영%손금해
转基因%猪生长激素基因(pGH)%β-肌动蛋白基因%实时荧光定量PCR
轉基因%豬生長激素基因(pGH)%β-肌動蛋白基因%實時熒光定量PCR
전기인%저생장격소기인(pGH)%β-기동단백기인%실시형광정량PCR
为确定猪生长激素基因(pGH)在F1代转基因猪体内的遗传稳定性及其在育肥初期表达水平的差异,利用SYBR Green Ⅰ Real-time PCR法检测精子介导纳米基因载体法获得的F0代母猪与非转基因公猪配种所产的7头转pGH基因猪和9头非转基因猪3月龄生长激素的表达水平.根据16个血液样品荧光定量结果绘制溶解曲线和扩增曲线图谱,并用F=(1+E)-△△Ct,公式进行Ct均值的分析,得出F1代转pGH基因猪生长激素平均表达水平是同期非转基因猪的1.77倍.结果证实,1)外源pGH基因在转基因猪体内能稳定传代;2)并非每头转基因猪体内pGH基因的表达量均高于非转基因猪;3)在F1代转基因猪体内,pGH的平均表达水平显著高于同期非转基因猪.本实验建立了能够稳定测评家猪生长激素相对基因表达水平的方法,为研究转基因与非转基因动物之间生理指标与定量表达的差异性等提供了科学依据.
為確定豬生長激素基因(pGH)在F1代轉基因豬體內的遺傳穩定性及其在育肥初期錶達水平的差異,利用SYBR Green Ⅰ Real-time PCR法檢測精子介導納米基因載體法穫得的F0代母豬與非轉基因公豬配種所產的7頭轉pGH基因豬和9頭非轉基因豬3月齡生長激素的錶達水平.根據16箇血液樣品熒光定量結果繪製溶解麯線和擴增麯線圖譜,併用F=(1+E)-△△Ct,公式進行Ct均值的分析,得齣F1代轉pGH基因豬生長激素平均錶達水平是同期非轉基因豬的1.77倍.結果證實,1)外源pGH基因在轉基因豬體內能穩定傳代;2)併非每頭轉基因豬體內pGH基因的錶達量均高于非轉基因豬;3)在F1代轉基因豬體內,pGH的平均錶達水平顯著高于同期非轉基因豬.本實驗建立瞭能夠穩定測評傢豬生長激素相對基因錶達水平的方法,為研究轉基因與非轉基因動物之間生理指標與定量錶達的差異性等提供瞭科學依據.
위학정저생장격소기인(pGH)재F1대전기인저체내적유전은정성급기재육비초기표체수평적차이,이용SYBR Green Ⅰ Real-time PCR법검측정자개도납미기인재체법획득적F0대모저여비전기인공저배충소산적7두전pGH기인저화9두비전기인저3월령생장격소적표체수평.근거16개혈액양품형광정량결과회제용해곡선화확증곡선도보,병용F=(1+E)-△△Ct,공식진행Ct균치적분석,득출F1대전pGH기인저생장격소평균표체수평시동기비전기인저적1.77배.결과증실,1)외원pGH기인재전기인저체내능은정전대;2)병비매두전기인저체내pGH기인적표체량균고우비전기인저;3)재F1대전기인저체내,pGH적평균표체수평현저고우동기비전기인저.본실험건립료능구은정측평가저생장격소상대기인표체수평적방법,위연구전기인여비전기인동물지간생리지표여정량표체적차이성등제공료과학의거.