北京农学院学报
北京農學院學報
북경농학원학보
JOURNAL OF BEIJING AGRICULTURAL COLLEGE
2012年
2期
31-34
,共4页
许承扬%满坤%张晓东%杨兵%王金洛%吴国娟
許承颺%滿坤%張曉東%楊兵%王金洛%吳國娟
허승양%만곤%장효동%양병%왕금락%오국연
猪传染性胃肠炎病毒%纤突蛋白%转基因玉米%免疫原性
豬傳染性胃腸炎病毒%纖突蛋白%轉基因玉米%免疫原性
저전염성위장염병독%섬돌단백%전기인옥미%면역원성
为鉴定猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白(TGEV-S)在转基因玉米中的表达及对试验小鼠的免疫原性,本试验在前期TGEV-S转基因玉米植株构建成功的基础上,自玉米叶片中抽提可溶性蛋白作为包被抗原,建立筛选表达TGEV-S转基因玉米的间接ELISA检测方法.结果显示在92份被检测植株中8株为阳性,取阳性值较高的2株152-3和156-6,提取叶片可溶性蛋白,与弗氏佐剂乳化后皮下注射免疫小鼠,只有植株156-6中可溶性蛋白免疫小鼠可产生针对TGEV的抗体,而152-3免疫组检测结果为阴性.利用156-6植株叶片对小鼠进行灌胃免疫,也可产生针对TGEV的特异性抗体.以上结果表明,获得的TGEV-S转基因玉米植株不但可表达TGEV-S蛋白,而且该蛋白通过注射或口服途径免疫小鼠后均可产生针对TGEV-S的特异性抗体,提示TGEV-S转基因玉米具有发展成为TGEV口服疫苗的潜力.
為鑒定豬傳染性胃腸炎病毒纖突蛋白(TGEV-S)在轉基因玉米中的錶達及對試驗小鼠的免疫原性,本試驗在前期TGEV-S轉基因玉米植株構建成功的基礎上,自玉米葉片中抽提可溶性蛋白作為包被抗原,建立篩選錶達TGEV-S轉基因玉米的間接ELISA檢測方法.結果顯示在92份被檢測植株中8株為暘性,取暘性值較高的2株152-3和156-6,提取葉片可溶性蛋白,與弗氏佐劑乳化後皮下註射免疫小鼠,隻有植株156-6中可溶性蛋白免疫小鼠可產生針對TGEV的抗體,而152-3免疫組檢測結果為陰性.利用156-6植株葉片對小鼠進行灌胃免疫,也可產生針對TGEV的特異性抗體.以上結果錶明,穫得的TGEV-S轉基因玉米植株不但可錶達TGEV-S蛋白,而且該蛋白通過註射或口服途徑免疫小鼠後均可產生針對TGEV-S的特異性抗體,提示TGEV-S轉基因玉米具有髮展成為TGEV口服疫苗的潛力.
위감정저전염성위장염병독섬돌단백(TGEV-S)재전기인옥미중적표체급대시험소서적면역원성,본시험재전기TGEV-S전기인옥미식주구건성공적기출상,자옥미협편중추제가용성단백작위포피항원,건립사선표체TGEV-S전기인옥미적간접ELISA검측방법.결과현시재92빈피검측식주중8주위양성,취양성치교고적2주152-3화156-6,제취협편가용성단백,여불씨좌제유화후피하주사면역소서,지유식주156-6중가용성단백면역소서가산생침대TGEV적항체,이152-3면역조검측결과위음성.이용156-6식주협편대소서진행관위면역,야가산생침대TGEV적특이성항체.이상결과표명,획득적TGEV-S전기인옥미식주불단가표체TGEV-S단백,이차해단백통과주사혹구복도경면역소서후균가산생침대TGEV-S적특이성항체,제시TGEV-S전기인옥미구유발전성위TGEV구복역묘적잠력.