中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
36期
6802-6806
,共5页
骨髓间充质干细胞%脑脊液%分离培养%表型%细胞鉴定
骨髓間充質榦細胞%腦脊液%分離培養%錶型%細胞鑒定
골수간충질간세포%뇌척액%분리배양%표형%세포감정
背景:细胞移植是脊髓损伤的一种有效治疗手段,但目前尚缺乏脑脊液对细胞影响的实验依据.目的:动态观察体外脑脊液培养骨髓间充质干细胞的变化.方法:采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,并传代扩增.选择生长良好的第3,4代细胞接种于脑脊液中,通过细胞免疫化学染色法鉴定脑脊液对细胞表型的影响.取生长良好的第5代细胞,分别用含小牛血清的L-DMEM和脑脊液培养.结果与结论:运用密度梯度离心结合贴壁培养法能成功有效地分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,表型鉴定结果为CD90、CD106、CD71、CD29阳性,CD45阴性.脑脊液培养后细胞仍为骨髓间充质干细胞形态,并可见少量小圆细胞,表现为神经样细胞,表形鉴定结果为CD90、CD106、CD71、CD29阳性,CD45阴性,神经元特异性烯醇化酶呈弱阳性(<1%).细胞具有相似的S形生长曲线,生长曲线基本相似.提示骨髓间充质干细胞在脑脊液培养基中可继续生长和增殖,无诱导分化作用,且细胞对生长环境有高度的适应性.
揹景:細胞移植是脊髓損傷的一種有效治療手段,但目前尚缺乏腦脊液對細胞影響的實驗依據.目的:動態觀察體外腦脊液培養骨髓間充質榦細胞的變化.方法:採用密度梯度離心結閤貼壁培養法分離純化大鼠骨髓間充質榦細胞,併傳代擴增.選擇生長良好的第3,4代細胞接種于腦脊液中,通過細胞免疫化學染色法鑒定腦脊液對細胞錶型的影響.取生長良好的第5代細胞,分彆用含小牛血清的L-DMEM和腦脊液培養.結果與結論:運用密度梯度離心結閤貼壁培養法能成功有效地分離純化大鼠骨髓間充質榦細胞,錶型鑒定結果為CD90、CD106、CD71、CD29暘性,CD45陰性.腦脊液培養後細胞仍為骨髓間充質榦細胞形態,併可見少量小圓細胞,錶現為神經樣細胞,錶形鑒定結果為CD90、CD106、CD71、CD29暘性,CD45陰性,神經元特異性烯醇化酶呈弱暘性(<1%).細胞具有相似的S形生長麯線,生長麯線基本相似.提示骨髓間充質榦細胞在腦脊液培養基中可繼續生長和增殖,無誘導分化作用,且細胞對生長環境有高度的適應性.
배경:세포이식시척수손상적일충유효치료수단,단목전상결핍뇌척액대세포영향적실험의거.목적:동태관찰체외뇌척액배양골수간충질간세포적변화.방법:채용밀도제도리심결합첩벽배양법분리순화대서골수간충질간세포,병전대확증.선택생장량호적제3,4대세포접충우뇌척액중,통과세포면역화학염색법감정뇌척액대세포표형적영향.취생장량호적제5대세포,분별용함소우혈청적L-DMEM화뇌척액배양.결과여결론:운용밀도제도리심결합첩벽배양법능성공유효지분리순화대서골수간충질간세포,표형감정결과위CD90、CD106、CD71、CD29양성,CD45음성.뇌척액배양후세포잉위골수간충질간세포형태,병가견소량소원세포,표현위신경양세포,표형감정결과위CD90、CD106、CD71、CD29양성,CD45음성,신경원특이성희순화매정약양성(<1%).세포구유상사적S형생장곡선,생장곡선기본상사.제시골수간충질간세포재뇌척액배양기중가계속생장화증식,무유도분화작용,차세포대생장배경유고도적괄응성.
