CAJ | 학술논문

目的探讨高体积分数氧(高氧)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC Ⅱ)硫氧还蛋白(Trx)及硫氧还蛋白还原酶(TrxR)表达的影响.方法无菌条件下取孕19 d SD大鼠的胎鼠肺组织,剪碎.采用1 g/L胰酶和1 g/L胶原酶消化19 d胎鼠肺组织块,经差速离心和反复贴壁法,分离、纯化、原代培养胎鼠AEC Ⅱ,待其生长至亚融合状态时,随机分为空气和高氧组.于培养箱内静置30 min后,空气组置于同一室内空气中,高氧组通以1 000 mL/L纯氧(2 l/min)10 min;然后密封培养瓶,置培养箱中培养.二组分别培养12、24、48 h,倒置相差显微镜下观察高氧对其细胞形态及活性的影响;并采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其Trx mRNA和TrxR mRNA表达.采用SPSS 13.0软件进行组间两样本均数t检验.结果细胞爬片上AEC Ⅱ纯度为(94±2)%,表明所获细胞适合研究使用.与空气组比较,随时间延长,高氧暴露各时间点AEC Ⅱ生长状态明显不良;悬浮细胞增多,但大多数细胞仍具有活力;高氧暴露可促使AEC ⅡTrx mRNA、TrxR mRNA表达增加,且二者分别于24 h(t=2.471 P=0.033)和48 h(t=2.916 P=0.015)表达最强.结论高氧暴露可促使胎鼠AEC ⅡTrx mRNA和TrxR mRNA表达上调;Trx和TrxR的表达上调可能是高氧肺损伤的重要保护作用机制之一.
목적 탐토고체적분수양(고양)대태서폐포Ⅱ형상피세포(AEC Ⅱ)류양환단백(Trx)급류양환단백환원매(TrxR)표체적영향.방법 무균조건하취잉19 d SD대서적태서폐조직,전쇄.채용1 g/L이매화1 g/L효원매소화19 d태서폐조직괴,경차속리심화반복첩벽법,분리、순화、원대배양태서AEC Ⅱ,대기생장지아융합상태시,수궤분위공기화고양조.우배양상내정치30 min후,공기조치우동일실내공기중,고양조통이1 000 mL/L순양(2 l/min)10 min;연후밀봉배양병,치배양상중배양.이조분별배양12、24、48 h,도치상차현미경하관찰고양대기세포형태급활성적영향;병채용반정량반전록취합매련반응(RT-PCR)방법검측기Trx mRNA화TrxR mRNA표체.채용SPSS 13.0연건진행조간량양본균수t검험.결과 세포파편상AEC Ⅱ순도위(94±2)%,표명소획세포괄합연구사용.여공기조비교,수시간연장,고양폭로각시간점AEC Ⅱ생장상태명현불량;현부세포증다,단대다수세포잉구유활력;고양폭로가촉사AEC ⅡTrx mRNA、TrxR mRNA표체증가,차이자분별우24 h(t=2.471 P=0.033)화48 h(t=2.916 P=0.015)표체최강.결론 고양폭로가촉사태서AEC ⅡTrx mRNA화TrxR mRNA표체상조;Trx화TrxR적표체상조가능시고양폐손상적중요보호작용궤제지일.