湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2011年
2期
75-78
,共4页
李志%姚立群%雷孝锋%王琨%莫小阳%吴秀山
李誌%姚立群%雷孝鋒%王琨%莫小暘%吳秀山
리지%요립군%뢰효봉%왕곤%막소양%오수산
斑马鱼%loc558117%融合蛋白%多克隆抗体
斑馬魚%loc558117%融閤蛋白%多剋隆抗體
반마어%loc558117%융합단백%다극륭항체
loc558117基因是trim45在斑马鱼中的同源基因,小鼠及果蝇研究结果表明该基因与血细胞发育有关.利用PCR技术扩增斑马鱼loc558117基因部分编码区,并将其插入到原核表达载体pET-28a中,经过酶切和测序鉴定后,将重组质粒(pET-28a-loc558117)转入Rosseta感受态细胞,通过IPTG诱导表达融合蛋白,his柱子亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体.获得了loc558117原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗loc558117多克隆抗体.为进一步研究loc558117功能提供了有力工具.
loc558117基因是trim45在斑馬魚中的同源基因,小鼠及果蠅研究結果錶明該基因與血細胞髮育有關.利用PCR技術擴增斑馬魚loc558117基因部分編碼區,併將其插入到原覈錶達載體pET-28a中,經過酶切和測序鑒定後,將重組質粒(pET-28a-loc558117)轉入Rosseta感受態細胞,通過IPTG誘導錶達融閤蛋白,his柱子親和純化,將純化的融閤蛋白免疫新西蘭大白兔,製備多剋隆抗體,併用Western Blot檢測抗體.穫得瞭loc558117原覈錶達重組融閤蛋白及高效價的特異性兔抗loc558117多剋隆抗體.為進一步研究loc558117功能提供瞭有力工具.
loc558117기인시trim45재반마어중적동원기인,소서급과승연구결과표명해기인여혈세포발육유관.이용PCR기술확증반마어loc558117기인부분편마구,병장기삽입도원핵표체재체pET-28a중,경과매절화측서감정후,장중조질립(pET-28a-loc558117)전입Rosseta감수태세포,통과IPTG유도표체융합단백,his주자친화순화,장순화적융합단백면역신서란대백토,제비다극륭항체,병용Western Blot검측항체.획득료loc558117원핵표체중조융합단백급고효개적특이성토항loc558117다극륭항체.위진일보연구loc558117공능제공료유력공구.
