CAJ | 학술논문

目的探讨白细胞介素-10 (IL-10)在炎性细胞因子介导的川崎病血管内皮损伤中的作用及机制.方法建立人脐静脉内皮细胞培养模型,ELISA双抗体夹心法检测川崎病患儿外周血单个核细胞(PBMC)活化后培养上清IL-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、IL-10的分泌量;Annexin V/PI双染色法,流式细胞仪检测川崎病患儿PBMC培养上清所诱导的内皮细胞凋亡率;凝胶电泳迁移率转换实验(EMSA)检测所活化PBMC核因子NF -κB活性.结果川崎病组患者PBMC体外刺激活化后IL-6、IL-1 β、TNF-α等炎性细胞因子及IL-10的分泌量均明显高于正常对照组(P＜0.01),其培养上清所诱导内皮细胞凋亡率(38.4±7.8)%较正常组(2.8±0.8)%明显升高.抗IL-6 、TNF-α McAb、IL-1ra加入川崎病患儿PBMC培养上清,可不同程度抑制川崎病患儿PBMC 培养上清所诱导内皮细胞的凋亡,而抗IL-10 McAb加入川崎病患儿PBMC培养上清所诱导内皮细胞的凋亡细胞反而增多,凋亡细胞的百分率高达(58.6±14.6)%.川崎病患儿PBMC刺激活化后核因子NF-κB活性显著增高.于PBMC培养上清加入IL-10,可见伴随着IL-6、IL -1β、TNF-α等炎性细胞因子在PBMC中的表达降低,NF-κB活性也降低,同时内皮细胞凋亡明显减少.结论 IL-10抑制川崎病患儿免疫活性细胞NF-κB 的生物活性及多种炎性细胞因子如IL-6、IL-1β、TNF-α产生,可能作为机体对川崎病全身免疫系统过度活化后的负反馈调节机制,在川崎病炎性细胞因子所介导的内皮细胞损伤中起保护作用.
목적탐토백세포개소-10 (IL-10)재염성세포인자개도적천기병혈관내피손상중적작용급궤제.방법건립인제정맥내피세포배양모형,ELISA쌍항체협심법검측천기병환인외주혈단개핵세포(PBMC)활화후배양상청IL-6、IL-1β、종류배사인자-α (TNF-α)、IL-10적분비량;Annexin V/PI쌍염색법,류식세포의검측천기병환인PBMC배양상청소유도적내피세포조망솔;응효전영천이솔전환실험(EMSA)검측소활화PBMC핵인자NF -κB활성.결과천기병조환자PBMC체외자격활화후IL-6、IL-1 β、TNF-α등염성세포인자급IL-10적분비량균명현고우정상대조조(P＜0.01),기배양상청소유도내피세포조망솔(38.4±7.8)%교정상조(2.8±0.8)%명현승고.항IL-6 、TNF-α McAb、IL-1ra가입천기병환인PBMC배양상청,가불동정도억제천기병환인PBMC 배양상청소유도내피세포적조망,이항IL-10 McAb가입천기병환인PBMC배양상청소유도내피세포적조망세포반이증다,조망세포적백분솔고체(58.6±14.6)%.천기병환인PBMC자격활화후핵인자NF-κB활성현저증고.우PBMC배양상청가입IL-10,가견반수착IL-6、IL -1β、TNF-α등염성세포인자재PBMC중적표체강저,NF-κB활성야강저,동시내피세포조망명현감소.결론 IL-10억제천기병환인면역활성세포NF-κB 적생물활성급다충염성세포인자여IL-6、IL-1β、TNF-α산생,가능작위궤체대천기병전신면역계통과도활화후적부반궤조절궤제,재천기병염성세포인자소개도적내피세포손상중기보호작용.