植物检疫
植物檢疫
식물검역
PLANT QUARANTINE
2000年
5期
257-260
,共4页
孔宝华%陈海如%常胜军%朱水芳%黄文胜%刘进元
孔寶華%陳海如%常勝軍%硃水芳%黃文勝%劉進元
공보화%진해여%상성군%주수방%황문성%류진원
李坏死环斑病毒%RT-PCR%检测%克隆
李壞死環斑病毒%RT-PCR%檢測%剋隆
리배사배반병독%RT-PCR%검측%극륭
为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒(PNRSV),根据该病毒RNA 3序列设计引物,对感病和健康组织总RNA进行RT-PCR,结果从感病组织中扩增出了大约450bp的目的片段,而健康组织中无此扩增带.将此PCR产物连接到pGEM-T-easy载体,转化大肠杆菌DH55α菌株,得到了含有目的片段的重组子,并采用双脱氧终止法进行序列分析,结果与美国报道的李坏死环斑病毒RNA3序列对应部分核苷酸基本一致(其同源性达93.6%),这表明应用RT-PCR来检测李坏死环斑病毒是可行的;PCR产物克隆作为RT-PCR反应的阳性对照解决了检疫对象不能扩散的问题,从而建立了RT-PCR快速检测方法.
為瞭從植物組織中快速檢測李壞死環斑病毒(PNRSV),根據該病毒RNA 3序列設計引物,對感病和健康組織總RNA進行RT-PCR,結果從感病組織中擴增齣瞭大約450bp的目的片段,而健康組織中無此擴增帶.將此PCR產物連接到pGEM-T-easy載體,轉化大腸桿菌DH55α菌株,得到瞭含有目的片段的重組子,併採用雙脫氧終止法進行序列分析,結果與美國報道的李壞死環斑病毒RNA3序列對應部分覈苷痠基本一緻(其同源性達93.6%),這錶明應用RT-PCR來檢測李壞死環斑病毒是可行的;PCR產物剋隆作為RT-PCR反應的暘性對照解決瞭檢疫對象不能擴散的問題,從而建立瞭RT-PCR快速檢測方法.
위료종식물조직중쾌속검측리배사배반병독(PNRSV),근거해병독RNA 3서렬설계인물,대감병화건강조직총RNA진행RT-PCR,결과종감병조직중확증출료대약450bp적목적편단,이건강조직중무차확증대.장차PCR산물련접도pGEM-T-easy재체,전화대장간균DH55α균주,득도료함유목적편단적중조자,병채용쌍탈양종지법진행서렬분석,결과여미국보도적리배사배반병독RNA3서렬대응부분핵감산기본일치(기동원성체93.6%),저표명응용RT-PCR래검측리배사배반병독시가행적;PCR산물극륭작위RT-PCR반응적양성대조해결료검역대상불능확산적문제,종이건립료RT-PCR쾌속검측방법.
