生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2009年
4期
464-470
,共7页
柏燕燕%史毅%惠国桢%张艳荣%董万利%胡锦%金由辛
柏燕燕%史毅%惠國楨%張豔榮%董萬利%鬍錦%金由辛
백연연%사의%혜국정%장염영%동만리%호금%금유신
神经胶质瘤%U251细胞%小干扰RNA%EphA2
神經膠質瘤%U251細胞%小榦擾RNA%EphA2
신경효질류%U251세포%소간우RNA%EphA2
为了研究EphA2对神经胶质瘤细胞系U251在增殖、凋亡、迁移和侵袭方面所起的作用,用RT-PCR方法检测正常脑组织标本与两种恶性胶质瘤细胞系中EphA2 mRNA表达水平,然后用化学合成的针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA)下调该基因的表达,以检测其在U251中的生物学功能.证实了EphA2基因在正常脑组织标本中的表达水平远低于两种恶性胶质瘤细胞系.把体外化学合成针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA-EphA2)转染入U251细胞后,Western blot,实时定量RT-PCR检测到U251细胞中EphA2蛋白及mRNA表达水平都明显降低,并且细胞增殖受到显著抑制,同时出现了明显的细胞凋亡.伤口愈合实验(检测细胞迁移能力),Transwell小室实验(检测细胞侵袭能力)均表明,下调EphA2的表达后,细胞的迁移和侵袭能力较阴性对照组显著减弱.上述结果表明,在神经胶质瘤U251细胞中,EphA2与其恶性增殖及高度侵染性相关,可作为分子治疗的有效靶点.
為瞭研究EphA2對神經膠質瘤細胞繫U251在增殖、凋亡、遷移和侵襲方麵所起的作用,用RT-PCR方法檢測正常腦組織標本與兩種噁性膠質瘤細胞繫中EphA2 mRNA錶達水平,然後用化學閤成的針對EphA2基因的小榦擾RNA(siRNA)下調該基因的錶達,以檢測其在U251中的生物學功能.證實瞭EphA2基因在正常腦組織標本中的錶達水平遠低于兩種噁性膠質瘤細胞繫.把體外化學閤成針對EphA2基因的小榦擾RNA(siRNA-EphA2)轉染入U251細胞後,Western blot,實時定量RT-PCR檢測到U251細胞中EphA2蛋白及mRNA錶達水平都明顯降低,併且細胞增殖受到顯著抑製,同時齣現瞭明顯的細胞凋亡.傷口愈閤實驗(檢測細胞遷移能力),Transwell小室實驗(檢測細胞侵襲能力)均錶明,下調EphA2的錶達後,細胞的遷移和侵襲能力較陰性對照組顯著減弱.上述結果錶明,在神經膠質瘤U251細胞中,EphA2與其噁性增殖及高度侵染性相關,可作為分子治療的有效靶點.
위료연구EphA2대신경효질류세포계U251재증식、조망、천이화침습방면소기적작용,용RT-PCR방법검측정상뇌조직표본여량충악성효질류세포계중EphA2 mRNA표체수평,연후용화학합성적침대EphA2기인적소간우RNA(siRNA)하조해기인적표체,이검측기재U251중적생물학공능.증실료EphA2기인재정상뇌조직표본중적표체수평원저우량충악성효질류세포계.파체외화학합성침대EphA2기인적소간우RNA(siRNA-EphA2)전염입U251세포후,Western blot,실시정량RT-PCR검측도U251세포중EphA2단백급mRNA표체수평도명현강저,병차세포증식수도현저억제,동시출현료명현적세포조망.상구유합실험(검측세포천이능력),Transwell소실실험(검측세포침습능력)균표명,하조EphA2적표체후,세포적천이화침습능력교음성대조조현저감약.상술결과표명,재신경효질류U251세포중,EphA2여기악성증식급고도침염성상관,가작위분자치료적유효파점.
