复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2008年
3期
325-329
,共5页
孙淑娜%桂永浩%宋后燕%蒋璆%王跃祥
孫淑娜%桂永浩%宋後燕%蔣璆%王躍祥
손숙나%계영호%송후연%장구%왕약상
hand2%斑马鱼%胚胎发育%吗啡啉修饰的反义核苷酸
hand2%斑馬魚%胚胎髮育%嗎啡啉脩飾的反義覈苷痠
hand2%반마어%배태발육%마배람수식적반의핵감산
目的 观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholi-no oligonucleotides,MO)使hand2表达下调的有效性.观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用,为利用斑马鱼开展hand2的功能研究提供线索.方法 采用胚胎整体原位杂交的方法观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况.利用向斑马鱼受精卵显微注射MO的方法使hand2表达下调,并进行hand2表达下调的效率验证.将斑马鱼单细胞受精卵分为4组进行显微注射,即对照MO(Con MO)注射组、hand2 MO注射组、hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2 MO注射组.在荧光显微镜下观察hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2 MO注射组的荧光表达情况以验证hand2表达下调的效率.在显微镜下观察hand2 MO注射组斑马鱼胚胎的各器官发育情况并进行评定.结果 hand2在斑马鱼胚胎的侧板中胚层、咽弓、心脏和鳍有较强表达.hand2-GFP mRNA注射组在8 hpf(hours post fertilization)时胚胎有较强的荧光表达,而hand2-GFP mRNA+hand2 MO注射组胚胎几乎无荧光表达.与Con MO注射组相比,hana2 MO注射组斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节有明显的发育异常.结论 向斑马鱼受精卵显微注射hand2 MO的方法可有效的使hand2表达下调.hand2在斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节的发育过程中有重要作用.
目的 觀察hand2在斑馬魚胚胎內的錶達情況,驗證顯微註射嗎啡啉脩飾的反義寡覈苷痠(Morpholi-no oligonucleotides,MO)使hand2錶達下調的有效性.觀察hand2錶達下調後斑馬魚胚胎髮育的異常錶型,初步探討hand2在斑馬魚胚胎髮育中的作用,為利用斑馬魚開展hand2的功能研究提供線索.方法 採用胚胎整體原位雜交的方法觀察hand2在斑馬魚胚胎內的錶達情況.利用嚮斑馬魚受精卵顯微註射MO的方法使hand2錶達下調,併進行hand2錶達下調的效率驗證.將斑馬魚單細胞受精卵分為4組進行顯微註射,即對照MO(Con MO)註射組、hand2 MO註射組、hand2-GFP mRNA註射組和hand2-GFP mRNA+hand2 MO註射組.在熒光顯微鏡下觀察hand2-GFP mRNA註射組和hand2-GFP mRNA+hand2 MO註射組的熒光錶達情況以驗證hand2錶達下調的效率.在顯微鏡下觀察hand2 MO註射組斑馬魚胚胎的各器官髮育情況併進行評定.結果 hand2在斑馬魚胚胎的側闆中胚層、嚥弓、心髒和鰭有較彊錶達.hand2-GFP mRNA註射組在8 hpf(hours post fertilization)時胚胎有較彊的熒光錶達,而hand2-GFP mRNA+hand2 MO註射組胚胎幾乎無熒光錶達.與Con MO註射組相比,hana2 MO註射組斑馬魚胚胎的心髒、血管、血細胞、鰭以及體節有明顯的髮育異常.結論 嚮斑馬魚受精卵顯微註射hand2 MO的方法可有效的使hand2錶達下調.hand2在斑馬魚胚胎的心髒、血管、血細胞、鰭以及體節的髮育過程中有重要作用.
목적 관찰hand2재반마어배태내적표체정황,험증현미주사마배람수식적반의과핵감산(Morpholi-no oligonucleotides,MO)사hand2표체하조적유효성.관찰hand2표체하조후반마어배태발육적이상표형,초보탐토hand2재반마어배태발육중적작용,위이용반마어개전hand2적공능연구제공선색.방법 채용배태정체원위잡교적방법관찰hand2재반마어배태내적표체정황.이용향반마어수정란현미주사MO적방법사hand2표체하조,병진행hand2표체하조적효솔험증.장반마어단세포수정란분위4조진행현미주사,즉대조MO(Con MO)주사조、hand2 MO주사조、hand2-GFP mRNA주사조화hand2-GFP mRNA+hand2 MO주사조.재형광현미경하관찰hand2-GFP mRNA주사조화hand2-GFP mRNA+hand2 MO주사조적형광표체정황이험증hand2표체하조적효솔.재현미경하관찰hand2 MO주사조반마어배태적각기관발육정황병진행평정.결과 hand2재반마어배태적측판중배층、인궁、심장화기유교강표체.hand2-GFP mRNA주사조재8 hpf(hours post fertilization)시배태유교강적형광표체,이hand2-GFP mRNA+hand2 MO주사조배태궤호무형광표체.여Con MO주사조상비,hana2 MO주사조반마어배태적심장、혈관、혈세포、기이급체절유명현적발육이상.결론 향반마어수정란현미주사hand2 MO적방법가유효적사hand2표체하조.hand2재반마어배태적심장、혈관、혈세포、기이급체절적발육과정중유중요작용.
