CAJ | 학술논문

目的:肾间质纤维化是肾脏疾病进展到肾功能衰竭的共同通路.通过观察益气活血法中药制剂对肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制.方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成.①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法分为模型组、西药蒙诺组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组和假手术组.实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求.②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术,假手术组打开大鼠腹腔后,分离其左侧输尿管,不结扎即关闭腹腔.益气活血法中药制剂主要由生黄芪,当归,赤白芍,丹参,黄芩,车前草,牛膝等组成.西药组、中药小剂量组、中药中剂量组和中药大剂量组于手术前2d开始灌胃给药,1次/d,其药量分别为:西药组蒙诺10 mg/(kg·d)、小剂量组0.018 mL/(kg·d)、中剂量组0.036 mL/(kg·d)、大剂量组0.072 mL/(kg·d),连续给予2周.模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃.③实验评估:6组大鼠于术后14 d麻醉后处死,观察梗阻肾脏病理改变,并用免疫组织化学方法检测肾组织对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,通过医学病理图像分析系统对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的积分光密度进行统计学分析.结果:30只大鼠全部进入结果分析.肾组织切片免疫组织化学方法结果显示:基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2主要表达部位在肾小管上皮,少量表达在肾间质和肾小球.基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3在模型组的表达较假手术组明显减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P＜0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组显著增强,积分光密度差异有显著性意义(P＜0.05).金属蛋白酶组织抑制因子2在模型组的表达较假手术组显著增强,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P＜0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组有所减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P＜0.05);中药小剂量组无论基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3还是金属蛋白酶组织抑制因子2的表达与模型组相比均较为相似,两组间积分光密度比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论:大鼠输尿管梗阻后呈现出的病理损害可能和肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2与金属蛋白酶组织抑制因子2的表达失衡有关,益气活血法可以上凋基质金属蛋白酶2,基质金属蛋白酶3的表达,下调金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,显示在抑制或延缓肾间质纤维化的进程中具有一定的作用. 目的:腎間質纖維化是腎髒疾病進展到腎功能衰竭的共同通路.通過觀察益氣活血法中藥製劑對腎間質纖維化大鼠腎組織基質金屬蛋白酶3,基質金屬蛋白酶2和金屬蛋白酶組織抑製因子2錶達的影響,探討其抗腎間質纖維化的作用機製.方法:實驗于2006-12/2007-06在首都醫科大學解剖與組織胚胎學繫實驗室完成.①實驗動物:Wistar雄性大鼠30隻,採用隨機數字法分為模型組、西藥矇諾組、中藥小劑量組、中藥中劑量組、中藥大劑量組和假手術組.實驗過程中對動物處置符閤動物倫理學要求.②實驗方法:其中前5組行單側輸尿管梗阻緻腎小管間質纖維化模型手術,假手術組打開大鼠腹腔後,分離其左側輸尿管,不結扎即關閉腹腔.益氣活血法中藥製劑主要由生黃芪,噹歸,赤白芍,丹參,黃芩,車前草,牛膝等組成.西藥組、中藥小劑量組、中藥中劑量組和中藥大劑量組于手術前2d開始灌胃給藥,1次/d,其藥量分彆為:西藥組矇諾10 mg/(kg·d)、小劑量組0.018 mL/(kg·d)、中劑量組0.036 mL/(kg·d)、大劑量組0.072 mL/(kg·d),連續給予2週.模型組及假手術組用相同體積的生理鹽水灌胃.③實驗評估:6組大鼠于術後14 d痳醉後處死,觀察梗阻腎髒病理改變,併用免疫組織化學方法檢測腎組織對基質金屬蛋白酶2、基質金屬蛋白酶3和金屬蛋白酶組織抑製因子2的錶達,通過醫學病理圖像分析繫統對基質金屬蛋白酶2、基質金屬蛋白酶3和金屬蛋白酶組織抑製因子2的積分光密度進行統計學分析.結果:30隻大鼠全部進入結果分析.腎組織切片免疫組織化學方法結果顯示:基質金屬蛋白酶2、基質金屬蛋白酶3和金屬蛋白酶組織抑製因子2主要錶達部位在腎小管上皮,少量錶達在腎間質和腎小毬.基質金屬蛋白酶2和基質金屬蛋白酶3在模型組的錶達較假手術組明顯減弱,兩組間積分光密度比較差異有顯著性意義(P＜0.05);中藥大、中劑量組及西藥矇諾組的錶達較模型組顯著增彊,積分光密度差異有顯著性意義(P＜0.05).金屬蛋白酶組織抑製因子2在模型組的錶達較假手術組顯著增彊,兩組間積分光密度比較差異有顯著性意義(P＜0.05);中藥大、中劑量組及西藥矇諾組的錶達較模型組有所減弱,兩組間積分光密度比較差異有顯著性意義(P＜0.05);中藥小劑量組無論基質金屬蛋白酶2和基質金屬蛋白酶3還是金屬蛋白酶組織抑製因子2的錶達與模型組相比均較為相似,兩組間積分光密度比較差異無顯著性意義(P＞0.05).結論:大鼠輸尿管梗阻後呈現齣的病理損害可能和腎組織基質金屬蛋白酶3,基質金屬蛋白酶2與金屬蛋白酶組織抑製因子2的錶達失衡有關,益氣活血法可以上凋基質金屬蛋白酶2,基質金屬蛋白酶3的錶達,下調金屬蛋白酶組織抑製因子2的錶達,顯示在抑製或延緩腎間質纖維化的進程中具有一定的作用.
목적:신간질섬유화시신장질병진전도신공능쇠갈적공동통로.통과관찰익기활혈법중약제제대신간질섬유화대서신조직기질금속단백매3,기질금속단백매2화금속단백매조직억제인자2표체적영향,탐토기항신간질섬유화적작용궤제.방법:실험우2006-12/2007-06재수도의과대학해부여조직배태학계실험실완성.①실험동물:Wistar웅성대서30지,채용수궤수자법분위모형조、서약몽낙조、중약소제량조、중약중제량조、중약대제량조화가수술조.실험과정중대동물처치부합동물윤리학요구.②실험방법:기중전5조행단측수뇨관경조치신소관간질섬유화모형수술,가수술조타개대서복강후,분리기좌측수뇨관,불결찰즉관폐복강.익기활혈법중약제제주요유생황기,당귀,적백작,단삼,황금,차전초,우슬등조성.서약조、중약소제량조、중약중제량조화중약대제량조우수술전2d개시관위급약,1차/d,기약량분별위:서약조몽낙10 mg/(kg·d)、소제량조0.018 mL/(kg·d)、중제량조0.036 mL/(kg·d)、대제량조0.072 mL/(kg·d),련속급여2주.모형조급가수술조용상동체적적생리염수관위.③실험평고:6조대서우술후14 d마취후처사,관찰경조신장병리개변,병용면역조직화학방법검측신조직대기질금속단백매2、기질금속단백매3화금속단백매조직억제인자2적표체,통과의학병리도상분석계통대기질금속단백매2、기질금속단백매3화금속단백매조직억제인자2적적분광밀도진행통계학분석.결과:30지대서전부진입결과분석.신조직절편면역조직화학방법결과현시:기질금속단백매2、기질금속단백매3화금속단백매조직억제인자2주요표체부위재신소관상피,소량표체재신간질화신소구.기질금속단백매2화기질금속단백매3재모형조적표체교가수술조명현감약,량조간적분광밀도비교차이유현저성의의(P＜0.05);중약대、중제량조급서약몽낙조적표체교모형조현저증강,적분광밀도차이유현저성의의(P＜0.05).금속단백매조직억제인자2재모형조적표체교가수술조현저증강,량조간적분광밀도비교차이유현저성의의(P＜0.05);중약대、중제량조급서약몽낙조적표체교모형조유소감약,량조간적분광밀도비교차이유현저성의의(P＜0.05);중약소제량조무론기질금속단백매2화기질금속단백매3환시금속단백매조직억제인자2적표체여모형조상비균교위상사,량조간적분광밀도비교차이무현저성의의(P＞0.05).결론:대서수뇨관경조후정현출적병리손해가능화신조직기질금속단백매3,기질금속단백매2여금속단백매조직억제인자2적표체실형유관,익기활혈법가이상조기질금속단백매2,기질금속단백매3적표체,하조금속단백매조직억제인자2적표체,현시재억제혹연완신간질섬유화적진정중구유일정적작용.