中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2007年
5期
359-363
,共5页
黄成玉%卢艳%王玮%鞠川%冯正%杨忠%王升跃%胡薇
黃成玉%盧豔%王瑋%鞠川%馮正%楊忠%王升躍%鬍薇
황성옥%로염%왕위%국천%풍정%양충%왕승약%호미
日本血吸虫%弹性蛋白酶基因%原核表达
日本血吸蟲%彈性蛋白酶基因%原覈錶達
일본혈흡충%탄성단백매기인%원핵표체
目的 克隆和表达日本血吸虫弹性蛋白酶基因(SjCE-2b),纯化表达重组蛋白,并研究该基因在各虫期的转录情况.方法 预测SjCE-2b基因的编码序列.绘制血吸虫尾蚴弹性蛋白酶家族成员系统进化树.用RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分析SjCE-2b基因在日本血吸虫各期转录的差异.将RT-PCR扩增得到的SjCE-2b基因亚克隆至载体pET28b,在大肠埃希菌中诱导表达得到重组蛋白rSjCE-2b,用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物,Western blotting分析其免疫原性.结果 在虫卵、子胞蚴和成虫检测到SjCE-2b基因转录本(714 bp),表达的重组蛋白rSjCE-2b,相对分子质量约为Mr31 000,与预测的融合蛋白相对分子质量相符.构建了重组原核表达载体SjCE-2b/pET28b,并在大肠埃希菌中表达.纯化后的重组蛋白rSjCE-2b可被日本血吸虫感染的兔血清识别.结论 在日本血吸虫虫卵、子胞蚴和成虫发现SjCE-2b基因转录本.SjCE-2b基因有可能成为潜在的日本血吸虫病疫苗候选抗原和药物及诊断靶点.
目的 剋隆和錶達日本血吸蟲彈性蛋白酶基因(SjCE-2b),純化錶達重組蛋白,併研究該基因在各蟲期的轉錄情況.方法 預測SjCE-2b基因的編碼序列.繪製血吸蟲尾蚴彈性蛋白酶傢族成員繫統進化樹.用RT-PCR和蛋白質印跡(Western blotting)分析SjCE-2b基因在日本血吸蟲各期轉錄的差異.將RT-PCR擴增得到的SjCE-2b基因亞剋隆至載體pET28b,在大腸埃希菌中誘導錶達得到重組蛋白rSjCE-2b,用組氨痠標籤親和層析法純化錶達產物,Western blotting分析其免疫原性.結果 在蟲卵、子胞蚴和成蟲檢測到SjCE-2b基因轉錄本(714 bp),錶達的重組蛋白rSjCE-2b,相對分子質量約為Mr31 000,與預測的融閤蛋白相對分子質量相符.構建瞭重組原覈錶達載體SjCE-2b/pET28b,併在大腸埃希菌中錶達.純化後的重組蛋白rSjCE-2b可被日本血吸蟲感染的兔血清識彆.結論 在日本血吸蟲蟲卵、子胞蚴和成蟲髮現SjCE-2b基因轉錄本.SjCE-2b基因有可能成為潛在的日本血吸蟲病疫苗候選抗原和藥物及診斷靶點.
목적 극륭화표체일본혈흡충탄성단백매기인(SjCE-2b),순화표체중조단백,병연구해기인재각충기적전록정황.방법 예측SjCE-2b기인적편마서렬.회제혈흡충미유탄성단백매가족성원계통진화수.용RT-PCR화단백질인적(Western blotting)분석SjCE-2b기인재일본혈흡충각기전록적차이.장RT-PCR확증득도적SjCE-2b기인아극륭지재체pET28b,재대장애희균중유도표체득도중조단백rSjCE-2b,용조안산표첨친화층석법순화표체산물,Western blotting분석기면역원성.결과 재충란、자포유화성충검측도SjCE-2b기인전록본(714 bp),표체적중조단백rSjCE-2b,상대분자질량약위Mr31 000,여예측적융합단백상대분자질량상부.구건료중조원핵표체재체SjCE-2b/pET28b,병재대장애희균중표체.순화후적중조단백rSjCE-2b가피일본혈흡충감염적토혈청식별.결론 재일본혈흡충충란、자포유화성충발현SjCE-2b기인전록본.SjCE-2b기인유가능성위잠재적일본혈흡충병역묘후선항원화약물급진단파점.
