医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2007年
11期
107-109
,共3页
袁海昕%肖白%梁燕%周艳
袁海昕%肖白%樑燕%週豔
원해흔%초백%량연%주염
角蛋白14%分子诊断%假基因%特异性扩增
角蛋白14%分子診斷%假基因%特異性擴增
각단백14%분자진단%가기인%특이성확증
目的 已报道有3种方法可以去除KRT14P对于KRT14分子诊断的干扰,分别为从活检组织中提取RNA法、用识别KRT14P的限制性内切酶酶切基因组DNA法和长距离特异性扩增KRT14法.本文建立特异性扩增法并和内切酶法就能否完全去除假基因干扰做比较.方法 据文献报道KRT14P外显子2上有AluI的酶切位点而KRT14外显子2上没有该位点,用AluI消化基因组DNA.部分消化和完全消化的酶切产物作为模板用于下一步KRT14的分子诊断.比对KRT14和KRT14P的区别,设计特殊引物对使其包括3'末端的碱基和KRT14P错配而和KRT14完全匹配,这些引物对在PCR过程中将只扩增KRT14而去除假基因的干扰.结果 部分酶切消化的基因组DNA因为不能完全去除KRT14P可能导致假阳性结果.应用本文中的特殊引物对,能够很好地去除KRT14P的干扰.结论 我们采用的特异性扩增法去除KRT14P较酶切法经济有效.
目的 已報道有3種方法可以去除KRT14P對于KRT14分子診斷的榦擾,分彆為從活檢組織中提取RNA法、用識彆KRT14P的限製性內切酶酶切基因組DNA法和長距離特異性擴增KRT14法.本文建立特異性擴增法併和內切酶法就能否完全去除假基因榦擾做比較.方法 據文獻報道KRT14P外顯子2上有AluI的酶切位點而KRT14外顯子2上沒有該位點,用AluI消化基因組DNA.部分消化和完全消化的酶切產物作為模闆用于下一步KRT14的分子診斷.比對KRT14和KRT14P的區彆,設計特殊引物對使其包括3'末耑的堿基和KRT14P錯配而和KRT14完全匹配,這些引物對在PCR過程中將隻擴增KRT14而去除假基因的榦擾.結果 部分酶切消化的基因組DNA因為不能完全去除KRT14P可能導緻假暘性結果.應用本文中的特殊引物對,能夠很好地去除KRT14P的榦擾.結論 我們採用的特異性擴增法去除KRT14P較酶切法經濟有效.
목적 이보도유3충방법가이거제KRT14P대우KRT14분자진단적간우,분별위종활검조직중제취RNA법、용식별KRT14P적한제성내절매매절기인조DNA법화장거리특이성확증KRT14법.본문건립특이성확증법병화내절매법취능부완전거제가기인간우주비교.방법 거문헌보도KRT14P외현자2상유AluI적매절위점이KRT14외현자2상몰유해위점,용AluI소화기인조DNA.부분소화화완전소화적매절산물작위모판용우하일보KRT14적분자진단.비대KRT14화KRT14P적구별,설계특수인물대사기포괄3'말단적감기화KRT14P착배이화KRT14완전필배,저사인물대재PCR과정중장지확증KRT14이거제가기인적간우.결과 부분매절소화적기인조DNA인위불능완전거제KRT14P가능도치가양성결과.응용본문중적특수인물대,능구흔호지거제KRT14P적간우.결론 아문채용적특이성확증법거제KRT14P교매절법경제유효.
