CAJ | 학술논문

目的研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fas mRNA表达的影响.方法用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2.5、0.25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96 h凋亡细胞比率;大、中、小剂量大蒜新素(9、6和3μg/mL)处理正常的和感染的HELF细胞(MOI为2.5)后上述各时间点凋亡细胞比率.用原位杂交法检测大剂量大蒜新素处理感染细胞(MIO为0.25)72 h后bcl-2和fas mRNA表达强度变化,并与正常细胞和感染细胞对比分析.结果正常细胞凋亡比率保持恒定低水平(凋亡率平均2.68%);低、高感染复数感染细胞随时间延长凋亡细胞逐渐增多,凋亡率峰值分别达8.85%(96 h)和25.63%(72 h);各剂量大蒜新素处理的正常细胞凋亡率增加,呈剂量依赖性,峰值分别为4.88%、6.47%和8.35%;但各剂量药物处理感染细胞后却使细胞凋亡比率下降,大剂量药物处理72 h时效应最为明显,凋亡细胞比率由25.63%降至16.24%.正常细胞高表达bcl-2,低表达fas基因;感染HCMV后,bcl-2表达显著下调,fas表达明显增强;大蒜新素处理感染细胞后使bcl-2表达强度明显高于感染细胞,fas表达水平明显低于感染细胞,但仍未恢复到正常细胞水平.结论HCMV是HELF凋亡的强诱导剂;病毒可通过下词凋亡抑制基因bcl-2和上调凋亡促进基因fas而发挥致凋亡作用.大蒜新素本身可诱导HELF凋亡,但却能明显抑制HCMV诱导的细胞凋亡,其抑制作用可能与药物干扰HCMV影响凋亡调控基因bcl-2和fas表达有关.
목적연구대산신소대인거세포병독(HCMV)유도감염적인배폐성섬유세포(HELF)조망적동태변화급조망조공기인bcl-2화fas mRNA표체적영향.방법용류식세포술측정HELF재고、저감염복수(MOI분별위2.5、0.25)HCMV감염후1、12、24、36、48、72、96 h조망세포비솔;대、중、소제량대산신소(9、6화3μg/mL)처리정상적화감염적HELF세포(MOI위2.5)후상술각시간점조망세포비솔.용원위잡교법검측대제량대산신소처리감염세포(MIO위0.25)72 h후bcl-2화fas mRNA표체강도변화,병여정상세포화감염세포대비분석.결과정상세포조망비솔보지항정저수평(조망솔평균2.68%);저、고감염복수감염세포수시간연장조망세포축점증다,조망솔봉치분별체8.85%(96 h)화25.63%(72 h);각제량대산신소처리적정상세포조망솔증가,정제량의뢰성,봉치분별위4.88%、6.47%화8.35%;단각제량약물처리감염세포후각사세포조망비솔하강,대제량약물처리72 h시효응최위명현,조망세포비솔유25.63%강지16.24%.정상세포고표체bcl-2,저표체fas기인;감염HCMV후,bcl-2표체현저하조,fas표체명현증강;대산신소처리감염세포후사bcl-2표체강도명현고우감염세포,fas표체수평명현저우감염세포,단잉미회복도정상세포수평.결론HCMV시HELF조망적강유도제;병독가통과하사조망억제기인bcl-2화상조조망촉진기인fas이발휘치조망작용.대산신소본신가유도HELF조망,단각능명현억제HCMV유도적세포조망,기억제작용가능여약물간우HCMV영향조망조공기인bcl-2화fas표체유관.