微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
6期
1050-1054
,共5页
猪链球菌2型%克隆表达%免疫原性%免疫蛋白组学
豬鏈毬菌2型%剋隆錶達%免疫原性%免疫蛋白組學
저련구균2형%극륭표체%면역원성%면역단백조학
利用免疫蛋白组学方法,鉴定出链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)江苏分离株HA9801具有免疫反应性的蛋白HM3.应用同源性比对、信号肽预测、跨膜区预测及亚定位预测等生物信息学方法对该蛋白进行分析,结果显示:同源性最高的蛋白为屎肠球菌胞外溶解物结合蛋白(41%);蛋白序列中含有信号肽结构;7-24位氨基酸为该蛋白的跨膜区;预测蛋白定位为除胞质外的未定位置.PCR扩增出该蛋白的一段基因定向克隆到表达载体pET-32a(+)中并转化入BL21(DE3)宿主菌.重组菌经IPTG诱导后的SDS-PAGE图谱在46kDa处出现融合蛋白的条带.Western blot表明,此融合蛋白可被SPF微型猪抗SS2血清所识别,提示该蛋白可作为该菌的亚单位疫苗的候选物.
利用免疫蛋白組學方法,鑒定齣鏈毬菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)江囌分離株HA9801具有免疫反應性的蛋白HM3.應用同源性比對、信號肽預測、跨膜區預測及亞定位預測等生物信息學方法對該蛋白進行分析,結果顯示:同源性最高的蛋白為屎腸毬菌胞外溶解物結閤蛋白(41%);蛋白序列中含有信號肽結構;7-24位氨基痠為該蛋白的跨膜區;預測蛋白定位為除胞質外的未定位置.PCR擴增齣該蛋白的一段基因定嚮剋隆到錶達載體pET-32a(+)中併轉化入BL21(DE3)宿主菌.重組菌經IPTG誘導後的SDS-PAGE圖譜在46kDa處齣現融閤蛋白的條帶.Western blot錶明,此融閤蛋白可被SPF微型豬抗SS2血清所識彆,提示該蛋白可作為該菌的亞單位疫苗的候選物.
이용면역단백조학방법,감정출련구균2형(Streptococcus suis type 2,SS2)강소분리주HA9801구유면역반응성적단백HM3.응용동원성비대、신호태예측、과막구예측급아정위예측등생물신식학방법대해단백진행분석,결과현시:동원성최고적단백위시장구균포외용해물결합단백(41%);단백서렬중함유신호태결구;7-24위안기산위해단백적과막구;예측단백정위위제포질외적미정위치.PCR확증출해단백적일단기인정향극륭도표체재체pET-32a(+)중병전화입BL21(DE3)숙주균.중조균경IPTG유도후적SDS-PAGE도보재46kDa처출현융합단백적조대.Western blot표명,차융합단백가피SPF미형저항SS2혈청소식별,제시해단백가작위해균적아단위역묘적후선물.
