生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
571-573
,共3页
王弋嘉%马翠卿%吴明健%郭彦%李军锋%周育森
王弋嘉%馬翠卿%吳明健%郭彥%李軍鋒%週育森
왕익가%마취경%오명건%곽언%리군봉%주육삼
严重急性呼吸综合征%冠状病毒%刺突蛋白%sf9昆虫细胞%免疫原性
嚴重急性呼吸綜閤徵%冠狀病毒%刺突蛋白%sf9昆蟲細胞%免疫原性
엄중급성호흡종합정%관상병독%자돌단백%sf9곤충세포%면역원성
目的:利用Bac-to-Bac1杆状病毒系统,在sf9昆虫细胞中表达严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)的S受体结合区蛋白片段,并对其免疫原性进行研究.方法:将S蛋白的受体结合区基因片段定向克隆至转座载体pFastBac1,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,用抗生素平板筛选重组杆粒.脂质体介导重组杆粒转染sf9昆虫细胞,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液.利用SARS病人恢复期抗血清做ELISA和Western印迹,分析重组蛋白的抗原性.结果:ELISA和Western印迹表明,在sf9昆虫细胞中表达的SARS-CoV S受体结合区重组蛋白可与SARS病人恢复期抗血清发生特异反应.结论:获得了在昆虫细胞内表达的SARS-CoV S受体结合区重组蛋白,并证明该蛋白有可能用于SARS感染的抗体检测,为SARS-CoV免疫机制及其疫苗的进一步研究奠定了基础.
目的:利用Bac-to-Bac1桿狀病毒繫統,在sf9昆蟲細胞中錶達嚴重急性呼吸綜閤徵(SARS)冠狀病毒(SARS-CoV)的S受體結閤區蛋白片段,併對其免疫原性進行研究.方法:將S蛋白的受體結閤區基因片段定嚮剋隆至轉座載體pFastBac1,轉化大腸桿菌DH10Bac感受態細胞,用抗生素平闆篩選重組桿粒.脂質體介導重組桿粒轉染sf9昆蟲細胞,待細胞形態明顯改變後收穫細胞和培養上清液.利用SARS病人恢複期抗血清做ELISA和Western印跡,分析重組蛋白的抗原性.結果:ELISA和Western印跡錶明,在sf9昆蟲細胞中錶達的SARS-CoV S受體結閤區重組蛋白可與SARS病人恢複期抗血清髮生特異反應.結論:穫得瞭在昆蟲細胞內錶達的SARS-CoV S受體結閤區重組蛋白,併證明該蛋白有可能用于SARS感染的抗體檢測,為SARS-CoV免疫機製及其疫苗的進一步研究奠定瞭基礎.
목적:이용Bac-to-Bac1간상병독계통,재sf9곤충세포중표체엄중급성호흡종합정(SARS)관상병독(SARS-CoV)적S수체결합구단백편단,병대기면역원성진행연구.방법:장S단백적수체결합구기인편단정향극륭지전좌재체pFastBac1,전화대장간균DH10Bac감수태세포,용항생소평판사선중조간립.지질체개도중조간립전염sf9곤충세포,대세포형태명현개변후수획세포화배양상청액.이용SARS병인회복기항혈청주ELISA화Western인적,분석중조단백적항원성.결과:ELISA화Western인적표명,재sf9곤충세포중표체적SARS-CoV S수체결합구중조단백가여SARS병인회복기항혈청발생특이반응.결론:획득료재곤충세포내표체적SARS-CoV S수체결합구중조단백,병증명해단백유가능용우SARS감염적항체검측,위SARS-CoV면역궤제급기역묘적진일보연구전정료기출.
