南开大学学报（自然科学版）
南開大學學報（自然科學版）
남개대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
2期
49-53
,共5页
马永刚%余荭%王金忠%陈启民%耿运琪
馬永剛%餘葒%王金忠%陳啟民%耿運琪
마영강%여홍%왕금충%진계민%경운기
牛泡沫病毒(BFV)%穿膜区%细胞毒性
牛泡沫病毒(BFV)%穿膜區%細胞毒性
우포말병독(BFV)%천막구%세포독성
泡沫病毒(FV)具有广泛的宿主范围,可以感染从人到鱼几乎所有脊椎动物细胞,可见其包膜蛋白具有极强的膜融合能力.分析牛泡沫病毒(BFV)的跨膜蛋白(TM),在其C端存在一个穿膜螺旋区,其中含有连续的疏水氨基酸.本文以BFV3026原病毒DNA为模板,利用PCR分段扩增TM编码区,克隆原核表达载体pET32a(+),序列分析证实后,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,仅有穿膜区完全缺失的TM3获得表达,其余含有完整或部分穿膜区的TM1及TM2均未表达.表达菌生长状态测定显示:TM穿膜区C端疏水氨基酸串联区对细胞具有强烈致死效应.同时利用金属螯合层析对所表达TM3蛋白进行初步纯化,Westernblot证实其有良好的抗原性.
泡沫病毒(FV)具有廣汎的宿主範圍,可以感染從人到魚幾乎所有脊椎動物細胞,可見其包膜蛋白具有極彊的膜融閤能力.分析牛泡沫病毒(BFV)的跨膜蛋白(TM),在其C耑存在一箇穿膜螺鏇區,其中含有連續的疏水氨基痠.本文以BFV3026原病毒DNA為模闆,利用PCR分段擴增TM編碼區,剋隆原覈錶達載體pET32a(+),序列分析證實後,轉化E.coli BL21(DE3),經IPTG誘導,僅有穿膜區完全缺失的TM3穫得錶達,其餘含有完整或部分穿膜區的TM1及TM2均未錶達.錶達菌生長狀態測定顯示:TM穿膜區C耑疏水氨基痠串聯區對細胞具有彊烈緻死效應.同時利用金屬螯閤層析對所錶達TM3蛋白進行初步純化,Westernblot證實其有良好的抗原性.
포말병독(FV)구유엄범적숙주범위,가이감염종인도어궤호소유척추동물세포,가견기포막단백구유겁강적막융합능력.분석우포말병독(BFV)적과막단백(TM),재기C단존재일개천막라선구,기중함유련속적소수안기산.본문이BFV3026원병독DNA위모판,이용PCR분단확증TM편마구,극륭원핵표체재체pET32a(+),서렬분석증실후,전화E.coli BL21(DE3),경IPTG유도,부유천막구완전결실적TM3획득표체,기여함유완정혹부분천막구적TM1급TM2균미표체.표체균생장상태측정현시:TM천막구C단소수안기산천련구대세포구유강렬치사효응.동시이용금속오합층석대소표체TM3단백진행초보순화,Westernblot증실기유량호적항원성.
