CAJ | 학술논문

目的探讨重组腺相关病毒载体(rAAV-2-eGFP)是否可高效转导入骨髓间充质干细胞(BMSCs).方法从初发的急性髓性白血病(AML)患者骨髓中分离培养出BMSCs,在不同的感染复数(MOI=102,103,104,105,106,107)下用包含增强型绿色荧光蛋白(eGFP)的rAAV-2-eGFP感染BMSCs,寻找最佳的感染条件,并在转染后的不同时间点用倒置荧光显微镜以及流式细胞仪观察其表达情况.结果转染后10～14 d,eGFP在BMSCs中表达,转染效率为0.3%～2%,增加MOI亦不能明显增加转染效率.在MOI=105的条件下转染后观察了61 d,eGFP保持低水平长期稳定表达,在转染后的12～33 d,eGFP阳性的BMSCs从起始时的1.16%下降到(0.5～0.6)%,33～61 d一直维持在这一水平.结论rAAV-2-eGFP和BMSCs可用于体外基因治疗,但极低的转染效率可能是其进一步应用的障碍.
목적탐토중조선상관병독재체(rAAV-2-eGFP)시부가고효전도입골수간충질간세포(BMSCs).방법종초발적급성수성백혈병(AML)환자골수중분리배양출BMSCs,재불동적감염복수(MOI=102,103,104,105,106,107)하용포함증강형록색형광단백(eGFP)적rAAV-2-eGFP감염BMSCs,심조최가적감염조건,병재전염후적불동시간점용도치형광현미경이급류식세포의관찰기표체정황.결과전염후10～14 d,eGFP재BMSCs중표체,전염효솔위0.3%～2%,증가MOI역불능명현증가전염효솔.재MOI=105적조건하전염후관찰료61 d,eGFP보지저수평장기은정표체,재전염후적12～33 d,eGFP양성적BMSCs종기시시적1.16%하강도(0.5～0.6)%,33～61 d일직유지재저일수평.결론rAAV-2-eGFP화BMSCs가용우체외기인치료,단겁저적전염효솔가능시기진일보응용적장애.