中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2006年
11期
1026-1030
,共5页
操敏%郭恒彬%周益龙%杨文富%王柏仁%王长军%朱进%潘秀珍
操敏%郭恆彬%週益龍%楊文富%王柏仁%王長軍%硃進%潘秀珍
조민%곽항빈%주익룡%양문부%왕백인%왕장군%주진%반수진
恙虫病%东方体%重组抗原%胶体金层析法
恙蟲病%東方體%重組抗原%膠體金層析法
양충병%동방체%중조항원%효체금층석법
目的 制备重组抗原,利用胶体金技术研制恙虫病快速诊断试剂.方法 用PCR扩增出Ptan株编码56kD外膜蛋白长约1 352bp的DNA,克隆至原核载体pET28a,构建了表达载体.表达产物经SDS-PAGE及Western-blot进行鉴定分析.将Ptan株和Gilliam 56kD截短重组抗原混合作为诊断抗原,研制胶体金免疫层析诊断试纸检测血样中的恙虫病特异性总抗体、IgM和IgG.结果 SDS-PAGE表明重组蛋白在相对分子质量约52kD处有表达目的条带,Western-blot证实该蛋白具有免疫活性.胶体金免疫层析法检测抗恙虫病东方体总抗体、IgM、IgG和IFA法检测IgG的敏感性分别为94.5%,81.4%,91.6%和86.2%,胶体金免疫层析法检测总抗体、IgM、IgG特异性分别为98.1%,100%,98.9%.结论 胶体金层析法可替代常规IFA法用于恙虫病诊断.
目的 製備重組抗原,利用膠體金技術研製恙蟲病快速診斷試劑.方法 用PCR擴增齣Ptan株編碼56kD外膜蛋白長約1 352bp的DNA,剋隆至原覈載體pET28a,構建瞭錶達載體.錶達產物經SDS-PAGE及Western-blot進行鑒定分析.將Ptan株和Gilliam 56kD截短重組抗原混閤作為診斷抗原,研製膠體金免疫層析診斷試紙檢測血樣中的恙蟲病特異性總抗體、IgM和IgG.結果 SDS-PAGE錶明重組蛋白在相對分子質量約52kD處有錶達目的條帶,Western-blot證實該蛋白具有免疫活性.膠體金免疫層析法檢測抗恙蟲病東方體總抗體、IgM、IgG和IFA法檢測IgG的敏感性分彆為94.5%,81.4%,91.6%和86.2%,膠體金免疫層析法檢測總抗體、IgM、IgG特異性分彆為98.1%,100%,98.9%.結論 膠體金層析法可替代常規IFA法用于恙蟲病診斷.
목적 제비중조항원,이용효체금기술연제양충병쾌속진단시제.방법 용PCR확증출Ptan주편마56kD외막단백장약1 352bp적DNA,극륭지원핵재체pET28a,구건료표체재체.표체산물경SDS-PAGE급Western-blot진행감정분석.장Ptan주화Gilliam 56kD절단중조항원혼합작위진단항원,연제효체금면역층석진단시지검측혈양중적양충병특이성총항체、IgM화IgG.결과 SDS-PAGE표명중조단백재상대분자질량약52kD처유표체목적조대,Western-blot증실해단백구유면역활성.효체금면역층석법검측항양충병동방체총항체、IgM、IgG화IFA법검측IgG적민감성분별위94.5%,81.4%,91.6%화86.2%,효체금면역층석법검측총항체、IgM、IgG특이성분별위98.1%,100%,98.9%.결론 효체금층석법가체대상규IFA법용우양충병진단.
