CAJ | 학술논문

本研究探讨内皮抑制素(endostatin)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在骨髓移植(BMT)小鼠骨髓基质细胞中表达的相关性及川芎嗪对其表达的影响.取健康BALB/c小鼠,随机分为3组:正常组(不做处理),骨髓移植对照组(简称生理盐水组)和骨髓移植+川芎嗪治疗组(简称川芎嗪组).生理盐水组和川芎嗪组分别胃饲生理盐水0.2毫升/只和川芎嗪注射液每次2毫克/只,2次/天.在BMT后第7、14、21、28天处死小鼠,用间接免疫荧光法和RT-PCR法检测骨髓基质细胞endostatin mRNA及其蛋白、VCAM-1 mRNA及其蛋白的表达情况,并探讨二者表达的相关性.结果表明: endostatin蛋白主要表达于骨髓基质细胞核内,VCAM-1蛋白主要表达于细胞浆内.BMT后第7、14、21天川芎嗪组和生理盐水组endostatin mRNA和蛋白的表达水平显著低于正常组(P＜0.01或P＜0.05),且川芎嗪组低于生理盐水组(P＜0.01或P＜0.05);到第28天生理盐水组已基本恢复正常,而川芎嗪组仍未恢复正常水平.BMT后第7、14、21天川芎嗪组和生理盐水组VCAM-1 mRNA和蛋白的表达均明显低于正常组(P＜0.01或P＜0.05),且川芎嗪组明显高于生理盐水组(P＜0.01或P＜0.05),到第28天,川芎嗪组VCAM-1的表达已基本恢复正常,而生理盐水组仍未恢复正常,两组之间有显著性差异(P＜0.01).相关分析显示,生理盐水组骨髓基质细胞endostatin和VCAM-1 mRNA及其蛋白表达呈负相关(P＜0.01或P＜0.05),而川芎嗪组endostatin和VCAM-1 mRNA及其蛋白表达呈正相关(P＜0.01或P＜0.05). 结论: 内皮抑制素可通过影响骨髓基质细胞表面VCAM-1的表达水平,阻碍基质细胞与造血细胞之间和细胞外基质与造血细胞之间的联系而影响骨髓造血;川芎嗪能提高BMT小鼠骨髓基质细胞表面黏附分子的表达,加快BMT后HSPC的归巢及在骨髓中的增殖,并通过反馈调节BMT小鼠骨髓基质细胞新血管生成抑制因子内皮抑制素的表达,促进骨髓微环境的修复,加速移植后骨髓的造血重建. 本研究探討內皮抑製素(endostatin)及血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)在骨髓移植(BMT)小鼠骨髓基質細胞中錶達的相關性及川芎嗪對其錶達的影響.取健康BALB/c小鼠,隨機分為3組:正常組(不做處理),骨髓移植對照組(簡稱生理鹽水組)和骨髓移植+川芎嗪治療組(簡稱川芎嗪組).生理鹽水組和川芎嗪組分彆胃飼生理鹽水0.2毫升/隻和川芎嗪註射液每次2毫剋/隻,2次/天.在BMT後第7、14、21、28天處死小鼠,用間接免疫熒光法和RT-PCR法檢測骨髓基質細胞endostatin mRNA及其蛋白、VCAM-1 mRNA及其蛋白的錶達情況,併探討二者錶達的相關性.結果錶明: endostatin蛋白主要錶達于骨髓基質細胞覈內,VCAM-1蛋白主要錶達于細胞漿內.BMT後第7、14、21天川芎嗪組和生理鹽水組endostatin mRNA和蛋白的錶達水平顯著低于正常組(P＜0.01或P＜0.05),且川芎嗪組低于生理鹽水組(P＜0.01或P＜0.05);到第28天生理鹽水組已基本恢複正常,而川芎嗪組仍未恢複正常水平.BMT後第7、14、21天川芎嗪組和生理鹽水組VCAM-1 mRNA和蛋白的錶達均明顯低于正常組(P＜0.01或P＜0.05),且川芎嗪組明顯高于生理鹽水組(P＜0.01或P＜0.05),到第28天,川芎嗪組VCAM-1的錶達已基本恢複正常,而生理鹽水組仍未恢複正常,兩組之間有顯著性差異(P＜0.01).相關分析顯示,生理鹽水組骨髓基質細胞endostatin和VCAM-1 mRNA及其蛋白錶達呈負相關(P＜0.01或P＜0.05),而川芎嗪組endostatin和VCAM-1 mRNA及其蛋白錶達呈正相關(P＜0.01或P＜0.05). 結論: 內皮抑製素可通過影響骨髓基質細胞錶麵VCAM-1的錶達水平,阻礙基質細胞與造血細胞之間和細胞外基質與造血細胞之間的聯繫而影響骨髓造血;川芎嗪能提高BMT小鼠骨髓基質細胞錶麵黏附分子的錶達,加快BMT後HSPC的歸巢及在骨髓中的增殖,併通過反饋調節BMT小鼠骨髓基質細胞新血管生成抑製因子內皮抑製素的錶達,促進骨髓微環境的脩複,加速移植後骨髓的造血重建.
본연구탐토내피억제소(endostatin)급혈관세포점부분자-1(VCAM-1)재골수이식(BMT)소서골수기질세포중표체적상관성급천궁진대기표체적영향.취건강BALB/c소서,수궤분위3조:정상조(불주처리),골수이식대조조(간칭생리염수조)화골수이식+천궁진치료조(간칭천궁진조).생리염수조화천궁진조분별위사생리염수0.2호승/지화천궁진주사액매차2호극/지,2차/천.재BMT후제7、14、21、28천처사소서,용간접면역형광법화RT-PCR법검측골수기질세포endostatin mRNA급기단백、VCAM-1 mRNA급기단백적표체정황,병탐토이자표체적상관성.결과표명: endostatin단백주요표체우골수기질세포핵내,VCAM-1단백주요표체우세포장내.BMT후제7、14、21천천궁진조화생리염수조endostatin mRNA화단백적표체수평현저저우정상조(P＜0.01혹P＜0.05),차천궁진조저우생리염수조(P＜0.01혹P＜0.05);도제28천생리염수조이기본회복정상,이천궁진조잉미회복정상수평.BMT후제7、14、21천천궁진조화생리염수조VCAM-1 mRNA화단백적표체균명현저우정상조(P＜0.01혹P＜0.05),차천궁진조명현고우생리염수조(P＜0.01혹P＜0.05),도제28천,천궁진조VCAM-1적표체이기본회복정상,이생리염수조잉미회복정상,량조지간유현저성차이(P＜0.01).상관분석현시,생리염수조골수기질세포endostatin화VCAM-1 mRNA급기단백표체정부상관(P＜0.01혹P＜0.05),이천궁진조endostatin화VCAM-1 mRNA급기단백표체정정상관(P＜0.01혹P＜0.05). 결론: 내피억제소가통과영향골수기질세포표면VCAM-1적표체수평,조애기질세포여조혈세포지간화세포외기질여조혈세포지간적련계이영향골수조혈;천궁진능제고BMT소서골수기질세포표면점부분자적표체,가쾌BMT후HSPC적귀소급재골수중적증식,병통과반궤조절BMT소서골수기질세포신혈관생성억제인자내피억제소적표체,촉진골수미배경적수복,가속이식후골수적조혈중건.