四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2006年
2期
445-450
,共6页
徐辉%雷高鹏%徐文华%贺顺姬%刘谊%董明奇%曹毅
徐輝%雷高鵬%徐文華%賀順姬%劉誼%董明奇%曹毅
서휘%뢰고붕%서문화%하순희%류의%동명기%조의
大肠杆菌%植酸酶%重组appA%耐热性
大腸桿菌%植痠酶%重組appA%耐熱性
대장간균%식산매%중조appA%내열성
提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因appA,测序结果表明该基因的ORF读框包含1440个核苷酸.将该基因重组于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,导入大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA.对表达条件进行了优化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG诱导表达植酸酶,表达量达到10%以上.在37℃,用钒钼酸铵法测定了表达的植酸酶活性为40740.7U/g,同时观察不同加热温度对植酸酶活性的影响程度.发现融合表达的植酸酶的耐热性得到提高.
提取大腸桿菌(SUGL)基因組DNA,通過PCR方法從基因組擴增得到植痠酶基因appA,測序結果錶明該基因的ORF讀框包含1440箇覈苷痠.將該基因重組于大腸桿菌錶達載體pET-32a(+)中,導入大腸桿菌BL21(DE3),構建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA.對錶達條件進行瞭優化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG誘導錶達植痠酶,錶達量達到10%以上.在37℃,用釩鉬痠銨法測定瞭錶達的植痠酶活性為40740.7U/g,同時觀察不同加熱溫度對植痠酶活性的影響程度.髮現融閤錶達的植痠酶的耐熱性得到提高.
제취대장간균(SUGL)기인조DNA,통과PCR방법종기인조확증득도식산매기인appA,측서결과표명해기인적ORF독광포함1440개핵감산.장해기인중조우대장간균표체재체pET-32a(+)중,도입대장간균BL21(DE3),구건공정균BL21(DE3)-pET32a-appA.대표체조건진행료우화,재30℃하,이0.1mmol/L IPTG유도표체식산매,표체량체도10%이상.재37℃,용범목산안법측정료표체적식산매활성위40740.7U/g,동시관찰불동가열온도대식산매활성적영향정도.발현융합표체적식산매적내열성득도제고.
