CAJ | 학술논문

采用PCR方法克隆了家蚕核型多角体病毒中国镇江株(BmNPV-ZJ strain)的酪氨酸蛋白磷酸酯酶基因(ptp),测定了该基因的核苷酸序列,比较了与相关病毒相应基因的同源性,并将该基因插入到原核表达质粒在大肠杆菌中进行了表达.该基因的编码部分由507个核苷酸组成,编码168个氨基酸残基的蛋白多肽,其中含有酪氨酸蛋白磷酸酶酯催化部位的"HC”基序.该基因与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)ptp基因和BmN-PV-T3株(日本)拟为的ptp基因核苷酸序列的同源性分别为96.8%和98.2%,蛋白质氨基酸序列的同源性分别为97.0%和97.6%.将该基因插入到温度诱导型表达质粒pBV221的温控启动子PRPL之后,在大肠杆菌JM109中表达了具有催化活性的蛋白质,分子量约为19kD,表达产物能催化对硝基酚磷酸钠(PNPP)的脱磷酸反应,这种催化作用可被钒酸钠和ZnCl2抑制.
채용PCR방법극륭료가잠핵형다각체병독중국진강주(BmNPV-ZJ strain)적락안산단백린산지매기인(ptp),측정료해기인적핵감산서렬,비교료여상관병독상응기인적동원성,병장해기인삽입도원핵표체질립재대장간균중진행료표체.해기인적편마부분유507개핵감산조성,편마168개안기산잔기적단백다태,기중함유락안산단백린산매지최화부위적"HC”기서.해기인여목숙은문야아핵형다각체병독(AcMNPV)ptp기인화BmN-PV-T3주(일본)의위적ptp기인핵감산서렬적동원성분별위96.8%화98.2%,단백질안기산서렬적동원성분별위97.0%화97.6%.장해기인삽입도온도유도형표체질립pBV221적온공계동자PRPL지후,재대장간균JM109중표체료구유최화활성적단백질,분자량약위19kD,표체산물능최화대초기분린산납(PNPP)적탈린산반응,저충최화작용가피범산납화ZnCl2억제.