应用蛋白质工程法制备含硒单链抗体酶
응용단백질공정법제비함서단련항체매
Preparation of A Selenium-containing Single-chain Abzyme with Glutathione Peroxidase Activity by Protein Engineering
  • 万方数据
    中国生物制品学杂志 중국생물제품학잡지
    CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
    2001年 2期 87-90 ,共4页

    牟颖%高姝娟%张岩%苏丹%苏大明%任晓君%由德林%罗元明%闫岗林%罗贵民%黄华梁%刘子

    모영%고주연%장암%소단%소대명%임효군%유덕림%라원명%염강림%라귀민%황화량%류자

    单链抗体%包涵体%谷胱甘肽过氧化物酶%硒%化学突变 單鏈抗體%包涵體%穀胱甘肽過氧化物酶%硒%化學突變
    단련항체%포함체%곡광감태과양화물매%서%화학돌변
    目的制备一种具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的含硒单链抗体酶.方法利用RT-PCR方法从杂交瘤细胞株2F3中扩增出单克隆抗体重链可变区和轻链可变区基因.经DNA序列测定后,构建成表达载体pTMF-scFv,经过金属螯合层析纯化、复性和化学诱变,得到含硒单链抗体酶.结果将重组质粒pTMF-scFv分别转化入大肠杆菌JM109(DE3)、BL21(DE3)和BL21(coden plus),表达目的蛋白分别占菌体总蛋白的5%～10%、15%～20%和25%～30%.该重组蛋白以包涵体形式存在,相对分子质量为30000.其GPX活性为3 400U/μmol,接近天然酶水平.结论为工业化制备含硒单链抗体酶奠定基础.
    목적제비일충구유곡광감태과양화물매(GPX)활성적함서단련항체매.방법이용RT-PCR방법종잡교류세포주2F3중확증출단극륭항체중련가변구화경련가변구기인.경DNA서렬측정후,구건성표체재체pTMF-scFv,경과금속오합층석순화、복성화화학유변,득도함서단련항체매.결과장중조질립pTMF-scFv분별전화입대장간균JM109(DE3)、BL21(DE3)화BL21(coden plus),표체목적단백분별점균체총단백적5%～10%、15%～20%화25%～30%.해중조단백이포함체형식존재,상대분자질량위30000.기GPX활성위3 400U/μmol,접근천연매수평.결론위공업화제비함서단련항체매전정기출.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문