中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2000年
6期
751-754
,共4页
苏彦辉%徐云剑%顾雪松%刘天昀%朱玉贤
囌彥輝%徐雲劍%顧雪鬆%劉天昀%硃玉賢
소언휘%서운검%고설송%류천윤%주옥현
全长cDNA%差别表达产物%克隆%PCR
全長cDNA%差彆錶達產物%剋隆%PCR
전장cDNA%차별표체산물%극륭%PCR
采用两步PCR法成功地克隆了一个全长的cDNA.首先,用差式分析法克隆得到差别表达的cDNA片段,再分别用这些片段内部的特异序列及cDNA两端不同接头的序列为引物进行第一步PCR扩增,得到差别cDNA片段的上游和下游序列.然后,根据第一步PCR扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步PCR,从而得到全长的cDNA.
採用兩步PCR法成功地剋隆瞭一箇全長的cDNA.首先,用差式分析法剋隆得到差彆錶達的cDNA片段,再分彆用這些片段內部的特異序列及cDNA兩耑不同接頭的序列為引物進行第一步PCR擴增,得到差彆cDNA片段的上遊和下遊序列.然後,根據第一步PCR擴增得到的上遊和下遊序列設計基因特異的引物進行第二步PCR,從而得到全長的cDNA.
채용량보PCR법성공지극륭료일개전장적cDNA.수선,용차식분석법극륭득도차별표체적cDNA편단,재분별용저사편단내부적특이서렬급cDNA량단불동접두적서렬위인물진행제일보PCR확증,득도차별cDNA편단적상유화하유서렬.연후,근거제일보PCR확증득도적상유화하유서렬설계기인특이적인물진행제이보PCR,종이득도전장적cDNA.