北京大学学报
北京大學學報
북경대학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS PEKINENSIS
2000年
6期
777-782
,共6页
口如琴%王蔚%李令媛%茹炳根
口如琴%王蔚%李令媛%茹炳根
구여금%왕위%리령원%여병근
小肠三叶因子%酶联免疫吸附检测%克隆表达
小腸三葉因子%酶聯免疫吸附檢測%剋隆錶達
소장삼협인자%매련면역흡부검측%극륭표체
人小肠三叶因子的cDNA,克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经IPTG诱导后,hITF以GST-hITF融合蛋白的形式表达,融合蛋白占细菌总蛋白的15%左右.经过Glutathione-Sepharose 4B亲和柱和Sephacry1 S 100分子筛层析纯化了hITF.SDS-PAGE和氨基酸分析证明得到了hITF纯品.以天然hITF为抗原免疫青紫蓝兔制备了抗血清,用纯化的IgG建立了hITF的酶联免疫吸附检测(ELISA)方法,给出了标准工作曲线.应用于纯化过程中样品峰的确立.
人小腸三葉因子的cDNA,剋隆到原覈錶達載體pGEX-4T-1中,經IPTG誘導後,hITF以GST-hITF融閤蛋白的形式錶達,融閤蛋白佔細菌總蛋白的15%左右.經過Glutathione-Sepharose 4B親和柱和Sephacry1 S 100分子篩層析純化瞭hITF.SDS-PAGE和氨基痠分析證明得到瞭hITF純品.以天然hITF為抗原免疫青紫藍兔製備瞭抗血清,用純化的IgG建立瞭hITF的酶聯免疫吸附檢測(ELISA)方法,給齣瞭標準工作麯線.應用于純化過程中樣品峰的確立.
인소장삼협인자적cDNA,극륭도원핵표체재체pGEX-4T-1중,경IPTG유도후,hITF이GST-hITF융합단백적형식표체,융합단백점세균총단백적15%좌우.경과Glutathione-Sepharose 4B친화주화Sephacry1 S 100분자사층석순화료hITF.SDS-PAGE화안기산분석증명득도료hITF순품.이천연hITF위항원면역청자람토제비료항혈청,용순화적IgG건립료hITF적매련면역흡부검측(ELISA)방법,급출료표준공작곡선.응용우순화과정중양품봉적학립.
