农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2003年
1期
25-29
,共5页
番茄果实%乙烯信号转导%EIN3(ethyleneinsensitive 3)基因%RT-PCR%cDNA文库筛选
番茄果實%乙烯信號轉導%EIN3(ethyleneinsensitive 3)基因%RT-PCR%cDNA文庫篩選
번가과실%을희신호전도%EIN3(ethyleneinsensitive 3)기인%RT-PCR%cDNA문고사선
根据拟南芥(Arabidopsis thaliana)、烟草(Nicotiana tabacum)EIN3基因保守区序列设计简并引物,采用RT-PCR扩增从番茄(Lycopersicon esculentum)果实中得到一个486 bp的同源片段.以此片段作为探针,从番茄果实cDNA文库中分离到一个拟南芥EIN3的同源基因的cDNA克隆,命名为Le-EIL.该克隆含有一个1 845 bp的开放阅读框,编码615个氨基酸.经同源分析,它与烟草TEIL基因的同源性为79%,与拟南芥EIN3、EIL1、EIL2和EIL3的同源性分别为59%、56%、52%、46%.Le-EIL基因表达与番茄果实的成熟及乙烯生成情况具有较强的相关性.在普通番茄果实的不同成熟时期Le-EIL基因都有表达,并且随着成熟度的增加基因表达有明显的增强,在转色期和粉红期Le-EIL基因的表达最强,在全红期后减弱.在转反义ACS基因的转基因番茄果实中,只有开花后60 d的果实中Le-EIL基因有微弱的表达,在其它成熟时期均没有表达.
根據擬南芥(Arabidopsis thaliana)、煙草(Nicotiana tabacum)EIN3基因保守區序列設計簡併引物,採用RT-PCR擴增從番茄(Lycopersicon esculentum)果實中得到一箇486 bp的同源片段.以此片段作為探針,從番茄果實cDNA文庫中分離到一箇擬南芥EIN3的同源基因的cDNA剋隆,命名為Le-EIL.該剋隆含有一箇1 845 bp的開放閱讀框,編碼615箇氨基痠.經同源分析,它與煙草TEIL基因的同源性為79%,與擬南芥EIN3、EIL1、EIL2和EIL3的同源性分彆為59%、56%、52%、46%.Le-EIL基因錶達與番茄果實的成熟及乙烯生成情況具有較彊的相關性.在普通番茄果實的不同成熟時期Le-EIL基因都有錶達,併且隨著成熟度的增加基因錶達有明顯的增彊,在轉色期和粉紅期Le-EIL基因的錶達最彊,在全紅期後減弱.在轉反義ACS基因的轉基因番茄果實中,隻有開花後60 d的果實中Le-EIL基因有微弱的錶達,在其它成熟時期均沒有錶達.
근거의남개(Arabidopsis thaliana)、연초(Nicotiana tabacum)EIN3기인보수구서렬설계간병인물,채용RT-PCR확증종번가(Lycopersicon esculentum)과실중득도일개486 bp적동원편단.이차편단작위탐침,종번가과실cDNA문고중분리도일개의남개EIN3적동원기인적cDNA극륭,명명위Le-EIL.해극륭함유일개1 845 bp적개방열독광,편마615개안기산.경동원분석,타여연초TEIL기인적동원성위79%,여의남개EIN3、EIL1、EIL2화EIL3적동원성분별위59%、56%、52%、46%.Le-EIL기인표체여번가과실적성숙급을희생성정황구유교강적상관성.재보통번가과실적불동성숙시기Le-EIL기인도유표체,병차수착성숙도적증가기인표체유명현적증강,재전색기화분홍기Le-EIL기인적표체최강,재전홍기후감약.재전반의ACS기인적전기인번가과실중,지유개화후60 d적과실중Le-EIL기인유미약적표체,재기타성숙시기균몰유표체.