西北农林科技大学学报(自然科学版)
西北農林科技大學學報(自然科學版)
서북농림과기대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY
2002年
5期
27-30
,共4页
尹明安%郭立%刘华伟%崔鸿文
尹明安%郭立%劉華偉%崔鴻文
윤명안%곽립%류화위%최홍문
番茄%组织培养%遗传转化
番茄%組織培養%遺傳轉化
번가%조직배양%유전전화
番茄ZF无菌苗出芽后5～7 d,子叶切成0.5 cm×0.5 cm小块,下胚轴切成1 cm的小段作为外植体,以MS为基本培养基,玉米素1.0 mg/L,6-苄基腺嘌呤1.0 mg/L分别与吲哚乙酸0.05,0.2,0.5和1.0 mg/L配成7个激素组合,经诱芽比较,确定MS+BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L为最佳生芽培养基,MS添加吲哚乙酸0.0,0.05,0.1和0.2 mg/L进行生根比较,确定MS+IAA 0.05 mg/L为最佳生根培养基.卡那霉素(Kan)临界浓度确定为25 mg/L.转化培养过程为:外植体于生芽培养基26 ℃,2 600 lx光下预培养24 h.农杆菌LBA4404过夜培养,用MS培养液稀释10～20倍,侵染外植体5 min,28 ℃黑暗共培养48 h.然后在MS+BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L+Kan 25 mg/L+Cef 200 mg/L筛选培养基上诱芽,每14 d转接1次.芽长至2 cm时,切下转至MS+IAA 0.05 mg/L+Kan 25 mg/L+Cef 100 mg/L培养基上生根.
番茄ZF無菌苗齣芽後5～7 d,子葉切成0.5 cm×0.5 cm小塊,下胚軸切成1 cm的小段作為外植體,以MS為基本培養基,玉米素1.0 mg/L,6-芐基腺嘌呤1.0 mg/L分彆與吲哚乙痠0.05,0.2,0.5和1.0 mg/L配成7箇激素組閤,經誘芽比較,確定MS+BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L為最佳生芽培養基,MS添加吲哚乙痠0.0,0.05,0.1和0.2 mg/L進行生根比較,確定MS+IAA 0.05 mg/L為最佳生根培養基.卡那黴素(Kan)臨界濃度確定為25 mg/L.轉化培養過程為:外植體于生芽培養基26 ℃,2 600 lx光下預培養24 h.農桿菌LBA4404過夜培養,用MS培養液稀釋10～20倍,侵染外植體5 min,28 ℃黑暗共培養48 h.然後在MS+BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L+Kan 25 mg/L+Cef 200 mg/L篩選培養基上誘芽,每14 d轉接1次.芽長至2 cm時,切下轉至MS+IAA 0.05 mg/L+Kan 25 mg/L+Cef 100 mg/L培養基上生根.
번가ZF무균묘출아후5～7 d,자협절성0.5 cm×0.5 cm소괴,하배축절성1 cm적소단작위외식체,이MS위기본배양기,옥미소1.0 mg/L,6-변기선표령1.0 mg/L분별여신타을산0.05,0.2,0.5화1.0 mg/L배성7개격소조합,경유아비교,학정MS+BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L위최가생아배양기,MS첨가신타을산0.0,0.05,0.1화0.2 mg/L진행생근비교,학정MS+IAA 0.05 mg/L위최가생근배양기.잡나매소(Kan)림계농도학정위25 mg/L.전화배양과정위:외식체우생아배양기26 ℃,2 600 lx광하예배양24 h.농간균LBA4404과야배양,용MS배양액희석10～20배,침염외식체5 min,28 ℃흑암공배양48 h.연후재MS+BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L+Kan 25 mg/L+Cef 200 mg/L사선배양기상유아,매14 d전접1차.아장지2 cm시,절하전지MS+IAA 0.05 mg/L+Kan 25 mg/L+Cef 100 mg/L배양기상생근.
