南京医科大学学报(自然科学版)
南京醫科大學學報(自然科學版)
남경의과대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING MEDICAL UNIVERSITY
2002年
4期
299-300
,共2页
李艳利%王若宁%张一鸣%陈丙莺
李豔利%王若寧%張一鳴%陳丙鶯
리염리%왕약저%장일명%진병앵
野生型p53cDNA%逆转录病毒表达载体
野生型p53cDNA%逆轉錄病毒錶達載體
야생형p53cDNA%역전록병독표체재체
目的:制备含野生型p53cDNA重组体的复制缺陷型逆转录病毒.方法:设计引物PCR扩增野生型p53cDNA,用T-A克隆的方法克隆入质粒载体pGEM-T,转化JM109,提取pGEM-T/p53重组体,双酶切得到野生型p53cDNA,然后再克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN,转化感受态大肠杆菌JM109,筛选pL(p53cDNA)SN重组体,脂质体法转染包装细胞AM12,G-418(geneticin)筛选,收集病毒液.结果:通过PCR和重组质粒酶切筛选出重组阳性克隆,收集含pL(p53cDNA)SN重组体的逆转录病毒.结论:含pL(p53cDNA)SN重组体的复制缺陷逆转录病毒可用于转染真核细胞等进一步研究.
目的:製備含野生型p53cDNA重組體的複製缺陷型逆轉錄病毒.方法:設計引物PCR擴增野生型p53cDNA,用T-A剋隆的方法剋隆入質粒載體pGEM-T,轉化JM109,提取pGEM-T/p53重組體,雙酶切得到野生型p53cDNA,然後再剋隆入逆轉錄病毒錶達載體pLXSN,轉化感受態大腸桿菌JM109,篩選pL(p53cDNA)SN重組體,脂質體法轉染包裝細胞AM12,G-418(geneticin)篩選,收集病毒液.結果:通過PCR和重組質粒酶切篩選齣重組暘性剋隆,收集含pL(p53cDNA)SN重組體的逆轉錄病毒.結論:含pL(p53cDNA)SN重組體的複製缺陷逆轉錄病毒可用于轉染真覈細胞等進一步研究.
목적:제비함야생형p53cDNA중조체적복제결함형역전록병독.방법:설계인물PCR확증야생형p53cDNA,용T-A극륭적방법극륭입질립재체pGEM-T,전화JM109,제취pGEM-T/p53중조체,쌍매절득도야생형p53cDNA,연후재극륭입역전록병독표체재체pLXSN,전화감수태대장간균JM109,사선pL(p53cDNA)SN중조체,지질체법전염포장세포AM12,G-418(geneticin)사선,수집병독액.결과:통과PCR화중조질립매절사선출중조양성극륭,수집함pL(p53cDNA)SN중조체적역전록병독.결론:함pL(p53cDNA)SN중조체적복제결함역전록병독가용우전염진핵세포등진일보연구.
