CAJ | 학술논문

背景与目的:目前缺少一种针对乙型肝炎病毒感染相关肝癌的有效免疫治疗手段.以树突状细胞( dendritic cell, DC)为基础的肿瘤特异性免疫治疗方法,为免疫治疗乙型肝炎病毒感染相关的肝癌提供了新方法 .本实验通过体外负载乙型肝炎表面抗原基因( HBsAg)的重组质粒转染 DC,制备 HBsAg-DC瘤苗,评价 HBsAg-DC瘤苗体外诱导抗 HepG2.2.15的细胞毒性 T淋巴细胞反应.方法:将已构建含 HBsAg基因的重组质粒 pCR3.1-S转染培养第 5天的 DC; Western blot和免疫荧光法鉴定转染基因表达;以 MTT法测定 DC诱导的抗 HepG2.2.15特异性细胞毒作用.结果:细胞表型鉴定结果显示诱导 5天的 DC CD1a、 CD11c、 CD86、 CD80和 HLA-DR表达量分别为 55.0%、 98.6%、 86.1%、 66.1% 和 88.9%;采用免疫荧光和 Western blot法研究表明 HBsAg基因能在转染的 DC中表达; MTT法检测特异性细胞毒作用结果显示:不同效靶比, pCR3.1-S转染 DC组均显示对 HepG2.2.15肝癌细胞高效特异的杀伤活性,杀伤率分别为:( 52.3± 2.8)%( E∶ T为 5∶ 1)、( 64.6± 2.4)%( 10∶ 1)、( 78.8± 2.6)%( 20∶ 1)、( 82.1± 2.4)%( 40∶ 1),显著高于 pCR3.1-DC 组和 DC组 (P< 0.05, n=4).结论:重组质粒转染的 DC能够有效表达 HBsAg;并在体外诱导出特异性 CTL反应.
배경여목적:목전결소일충침대을형간염병독감염상관간암적유효면역치료수단.이수돌상세포( dendritic cell, DC)위기출적종류특이성면역치료방법,위면역치료을형간염병독감염상관적간암제공료신방법 .본실험통과체외부재을형간염표면항원기인( HBsAg)적중조질립전염 DC,제비 HBsAg-DC류묘,평개 HBsAg-DC류묘체외유도항 HepG2.2.15적세포독성 T림파세포반응.방법:장이구건함 HBsAg기인적중조질립 pCR3.1-S전염배양제 5천적 DC; Western blot화면역형광법감정전염기인표체;이 MTT법측정 DC유도적항 HepG2.2.15특이성세포독작용.결과:세포표형감정결과현시유도 5천적 DC CD1a、 CD11c、 CD86、 CD80화 HLA-DR표체량분별위 55.0%、 98.6%、 86.1%、 66.1% 화 88.9%;채용면역형광화 Western blot법연구표명 HBsAg기인능재전염적 DC중표체; MTT법검측특이성세포독작용결과현시:불동효파비, pCR3.1-S전염 DC조균현시대 HepG2.2.15간암세포고효특이적살상활성,살상솔분별위:( 52.3± 2.8)%( E∶ T위 5∶ 1)、( 64.6± 2.4)%( 10∶ 1)、( 78.8± 2.6)%( 20∶ 1)、( 82.1± 2.4)%( 40∶ 1),현저고우 pCR3.1-DC 조화 DC조 (P< 0.05, n=4).결론:중조질립전염적 DC능구유효표체 HBsAg;병재체외유도출특이성 CTL반응.