中国热带医学
中國熱帶醫學
중국열대의학
CHINA TROPICAL MEDICINE
2006年
12期
2106-2109
,共4页
彭雁忠%贾宏%邹原%肖性龙%黄胜中%林镜中
彭雁忠%賈宏%鄒原%肖性龍%黃勝中%林鏡中
팽안충%가굉%추원%초성룡%황성중%림경중
志贺氏菌%O139霍乱弧菌%多联实时荧光PCR空肠弯曲菌
誌賀氏菌%O139霍亂弧菌%多聯實時熒光PCR空腸彎麯菌
지하씨균%O139곽란호균%다련실시형광PCR공장만곡균
目的 建立一种能同时检测志贺氏菌(Sh)、O139霍乱弧菌(O139VC)和空肠弯曲菌(CJ)的多联实时荧光PCR定量方法.方法 根据Sh的ipaH基因序列、O139VC的wbfR基因序列、CJ的c基因序列的开放读码框(orf),分别利用ABI Primer experess 2.0和DNAStar中的Primer Select软件设计出数对特异性的引物和探针,筛选出最佳的各组引物和探针组合,对引物、探针的浓度、Mg2+浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,从而建立了检测临床标本中Sh、O139VC和CJ的多联荧光PCR反应体系和检测方法.结果 实验显示该方法具有特异性强,灵敏度高,均达到100copies/ml.结论 多联实时荧光PCR方法可同时定量地检测临床标本中Sh、O139 VC、CJ,结果显示快速简便,准确高效,有利于上述病原菌所致疾病的早期诊断和治疗.
目的 建立一種能同時檢測誌賀氏菌(Sh)、O139霍亂弧菌(O139VC)和空腸彎麯菌(CJ)的多聯實時熒光PCR定量方法.方法 根據Sh的ipaH基因序列、O139VC的wbfR基因序列、CJ的c基因序列的開放讀碼框(orf),分彆利用ABI Primer experess 2.0和DNAStar中的Primer Select軟件設計齣數對特異性的引物和探針,篩選齣最佳的各組引物和探針組閤,對引物、探針的濃度、Mg2+濃度、Taq酶的用量、反應條件等進行優化,從而建立瞭檢測臨床標本中Sh、O139VC和CJ的多聯熒光PCR反應體繫和檢測方法.結果 實驗顯示該方法具有特異性彊,靈敏度高,均達到100copies/ml.結論 多聯實時熒光PCR方法可同時定量地檢測臨床標本中Sh、O139 VC、CJ,結果顯示快速簡便,準確高效,有利于上述病原菌所緻疾病的早期診斷和治療.
목적 건립일충능동시검측지하씨균(Sh)、O139곽란호균(O139VC)화공장만곡균(CJ)적다련실시형광PCR정량방법.방법 근거Sh적ipaH기인서렬、O139VC적wbfR기인서렬、CJ적c기인서렬적개방독마광(orf),분별이용ABI Primer experess 2.0화DNAStar중적Primer Select연건설계출수대특이성적인물화탐침,사선출최가적각조인물화탐침조합,대인물、탐침적농도、Mg2+농도、Taq매적용량、반응조건등진행우화,종이건립료검측림상표본중Sh、O139VC화CJ적다련형광PCR반응체계화검측방법.결과 실험현시해방법구유특이성강,령민도고,균체도100copies/ml.결론 다련실시형광PCR방법가동시정량지검측림상표본중Sh、O139 VC、CJ,결과현시쾌속간편,준학고효,유리우상술병원균소치질병적조기진단화치료.
