H5N1亚型高致病性禽流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其表达产物的生物学活性
H5N1아형고치병성금류감병독NP기인재곤충세포중적표체급기표체산물적생물학활성
Expression of NP gene of highly pathogenic avian influenza virus subtype H5N1 in insect cells and identification of biological activities of the expressed product
  • 万方数据
    中国兽医科学 중국수의과학
    VETERINARY SCIENCE IN CHINA
    2008年 5期 380-385 ,共6页

    万春和%刘明%刘春国%杨涛%刘大飞%齐金龙%陈浩%杜金铃%李洪涛

    만춘화%류명%류춘국%양도%류대비%제금룡%진호%두금령%리홍도

    禽流感病毒%核蛋白基因%昆虫细胞杆状病毒表达 禽流感病毒%覈蛋白基因%昆蟲細胞桿狀病毒錶達
    금류감병독%핵단백기인%곤충세포간상병독표체
    根据GenBank上登录的H5N1亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)核蛋白(NP)基因序列设计引物,通过PCR扩增出A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)毒株的NP基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,将筛选的阳性重组转座载体pFastBacGP67B-NP转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,构建了杆状病毒表达载体,获得了重组转座子(rBacmid-NP),在脂质体介导下转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBv-NP).SDS-PAGE分析、Westernblotting检测、免疫组化分析和ELISA试验结果表明,分子质量约为54 ku的重组核蛋白得到了高效表达,该表达蛋白具有良好的生物学活性.
    근거GenBank상등록적H5N1아형고치병성금류감병독(HPAIV)핵단백(NP)기인서렬설계인물,통과PCR확증출A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)독주적NP기인편단,장기극륭도pFastBacGP67B간상병독재체상,장사선적양성중조전좌재체pFastBacGP67B-NP전화지함유간상병독천사재체적DH10Bac감수태세포,경람백반사선화PCR감정,구건료간상병독표체재체,획득료중조전좌자(rBacmid-NP),재지질체개도하전염대수생장기적Sf9곤충세포,획득중조간상병독(rBv-NP).SDS-PAGE분석、Westernblotting검측、면역조화분석화ELISA시험결과표명,분자질량약위54 ku적중조핵단백득도료고효표체,해표체단백구유량호적생물학활성.
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