第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2008年
9期
1025-1028
,共4页
姜丹丹%杨生生%陈欢%陈松%郝强%陈励藻%蔡在龙
薑丹丹%楊生生%陳歡%陳鬆%郝彊%陳勵藻%蔡在龍
강단단%양생생%진환%진송%학강%진려조%채재룡
肝肿瘤%ski基因%siRNA干扰%瞬间转染
肝腫瘤%ski基因%siRNA榦擾%瞬間轉染
간종류%ski기인%siRNA간우%순간전염
目的:设计并化学合成针对原癌基因ski的siRNA分子片段,转染人肝癌HepG2细胞,观察其对HepG2细胞增殖、细胞周期和凋亡等生物学功能方面的影响.方法:设计并化学合成针对原癌基因ski的3个siRNA分子序列,阳离子脂质体法瞬间转染HepG2细胞,运用实时定量PCR法和Western印迹法检测细胞中ski基因在mRNA水平和蛋白水平的变化.然后利用MTT法和流式细胞术检测转染ski-siRNA的HepG2细胞增殖、细胞周期和凋亡等生物学功能方面指标的变化.结果:3对特异性ski-siRNA均有效地抑制了ski基因的表达,以siRNA-B抑制效果最好,可达到70%,而且随着转染时间的延长,ski的表达呈逐步下降趋势.转染ski-siRNA后HepG2细胞的增殖能力明显受到抑制(P<0.05),S期细胞明显减少,是阴性对照组的2倍以上.结论:靶向ski基因的siRNA分子片段可以有效地抑制人肝癌HepG2细胞的生长,使进入S期的细胞明显减少,其作用与下调ski基因的表达有关,ski可能是肝癌治疗的一个潜在靶点.
目的:設計併化學閤成針對原癌基因ski的siRNA分子片段,轉染人肝癌HepG2細胞,觀察其對HepG2細胞增殖、細胞週期和凋亡等生物學功能方麵的影響.方法:設計併化學閤成針對原癌基因ski的3箇siRNA分子序列,暘離子脂質體法瞬間轉染HepG2細胞,運用實時定量PCR法和Western印跡法檢測細胞中ski基因在mRNA水平和蛋白水平的變化.然後利用MTT法和流式細胞術檢測轉染ski-siRNA的HepG2細胞增殖、細胞週期和凋亡等生物學功能方麵指標的變化.結果:3對特異性ski-siRNA均有效地抑製瞭ski基因的錶達,以siRNA-B抑製效果最好,可達到70%,而且隨著轉染時間的延長,ski的錶達呈逐步下降趨勢.轉染ski-siRNA後HepG2細胞的增殖能力明顯受到抑製(P<0.05),S期細胞明顯減少,是陰性對照組的2倍以上.結論:靶嚮ski基因的siRNA分子片段可以有效地抑製人肝癌HepG2細胞的生長,使進入S期的細胞明顯減少,其作用與下調ski基因的錶達有關,ski可能是肝癌治療的一箇潛在靶點.
목적:설계병화학합성침대원암기인ski적siRNA분자편단,전염인간암HepG2세포,관찰기대HepG2세포증식、세포주기화조망등생물학공능방면적영향.방법:설계병화학합성침대원암기인ski적3개siRNA분자서렬,양리자지질체법순간전염HepG2세포,운용실시정량PCR법화Western인적법검측세포중ski기인재mRNA수평화단백수평적변화.연후이용MTT법화류식세포술검측전염ski-siRNA적HepG2세포증식、세포주기화조망등생물학공능방면지표적변화.결과:3대특이성ski-siRNA균유효지억제료ski기인적표체,이siRNA-B억제효과최호,가체도70%,이차수착전염시간적연장,ski적표체정축보하강추세.전염ski-siRNA후HepG2세포적증식능력명현수도억제(P<0.05),S기세포명현감소,시음성대조조적2배이상.결론:파향ski기인적siRNA분자편단가이유효지억제인간암HepG2세포적생장,사진입S기적세포명현감소,기작용여하조ski기인적표체유관,ski가능시간암치료적일개잠재파점.
