山西医药杂志
山西醫藥雜誌
산서의약잡지
SHANXI MEDICAL JOURNAL
2010年
1期
13-16
,共4页
肝肿瘤%RNA%小分子干扰%信号转导和转录激活因子
肝腫瘤%RNA%小分子榦擾%信號轉導和轉錄激活因子
간종류%RNA%소분자간우%신호전도화전록격활인자
目的 探讨应用RNAi技术沉默信号转导和转录激活因子(STAT3)基因对肝癌HepG2细胞的影响.方法 针对STAT3 mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA(SiRNA)的DNA模板,构建pGenesil-1-shRNA-STAT3重组质粒,转染人肝癌细胞HepG2细胞.通过半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测STAT3基因mRNA和蛋白水平的表达情况,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测转染后细胞增殖的变化.结果 成功构建了pGeneSil 1-shRNA-STAT3重组质粒,并转染HepG2肝癌细胞;半定量RT-PCR、Western blot结果显示,重组质粒转染组细胞的STAT3基因表达在mRNA及蛋白水平上显著低于对照组;MTT实验结果显示,重组质粒转染组细胞的增殖明显受到抑制.结论 pGeneSil 1.0-shRNA-STAT3转染HepG2肝癌细胞后,可有效抑制STAT3 的表达,并抑制肝癌细胞的生长及增殖.
目的 探討應用RNAi技術沉默信號轉導和轉錄激活因子(STAT3)基因對肝癌HepG2細胞的影響.方法 針對STAT3 mRNA序列設計閤成3對編碼小榦擾RNA(SiRNA)的DNA模闆,構建pGenesil-1-shRNA-STAT3重組質粒,轉染人肝癌細胞HepG2細胞.通過半定量反轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)、Western blot檢測STAT3基因mRNA和蛋白水平的錶達情況,採用四甲基偶氮唑藍(MTT)實驗檢測轉染後細胞增殖的變化.結果 成功構建瞭pGeneSil 1-shRNA-STAT3重組質粒,併轉染HepG2肝癌細胞;半定量RT-PCR、Western blot結果顯示,重組質粒轉染組細胞的STAT3基因錶達在mRNA及蛋白水平上顯著低于對照組;MTT實驗結果顯示,重組質粒轉染組細胞的增殖明顯受到抑製.結論 pGeneSil 1.0-shRNA-STAT3轉染HepG2肝癌細胞後,可有效抑製STAT3 的錶達,併抑製肝癌細胞的生長及增殖.
목적 탐토응용RNAi기술침묵신호전도화전록격활인자(STAT3)기인대간암HepG2세포적영향.방법 침대STAT3 mRNA서렬설계합성3대편마소간우RNA(SiRNA)적DNA모판,구건pGenesil-1-shRNA-STAT3중조질립,전염인간암세포HepG2세포.통과반정량반전록-취합매련반응(RT-PCR)、Western blot검측STAT3기인mRNA화단백수평적표체정황,채용사갑기우담서람(MTT)실험검측전염후세포증식적변화.결과 성공구건료pGeneSil 1-shRNA-STAT3중조질립,병전염HepG2간암세포;반정량RT-PCR、Western blot결과현시,중조질립전염조세포적STAT3기인표체재mRNA급단백수평상현저저우대조조;MTT실험결과현시,중조질립전염조세포적증식명현수도억제.결론 pGeneSil 1.0-shRNA-STAT3전염HepG2간암세포후,가유효억제STAT3 적표체,병억제간암세포적생장급증식.
