CAJ | 학술논문

OtsAB途径是谷氨酸棒杆菌胞内海藻糖3条合成途径中最主要的一条.从野生型谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC 13032出发,通过重叠延伸PCR及同源重组技术构建了OtsAB途径缺陷突变株Corynebacterium glutamicum(△otsAB);利用谷氨酸棒杆菌穿梭表达载体pEC-XK99E构建重组工程菌株Corynebacterium glutamicum(pECotsAB)过量表达同源otsA及otsB基因.考察了野生型、缺陷型及过量表达菌株对于不同渗透压和培养温度的耐受性及该条件下各菌株胞内海藻糖的含量.结果表明:不同培养条件下,Corynebacterium glutamicum(△otsAB)胞内海藻糖含量与同条件野生型相比减少了34.40%～44.96%,对于渗透压和温度的耐受性明显降低;在相同的培养温度(30℃)、不同的渗透压条件下,Corynebacterium glutami-cum(pECotsAB)胞内海藻糖含量与野生型相比增加了14.53%～34.5%;细胞对于温度和渗透压的耐受性随胞内海藻糖含量的增加而提高.
OtsAB도경시곡안산봉간균포내해조당3조합성도경중최주요적일조.종야생형곡안산봉간균(Corynebacterium glutamicum)ATCC 13032출발,통과중첩연신PCR급동원중조기술구건료OtsAB도경결함돌변주Corynebacterium glutamicum(△otsAB);이용곡안산봉간균천사표체재체pEC-XK99E구건중조공정균주Corynebacterium glutamicum(pECotsAB)과량표체동원otsA급otsB기인.고찰료야생형、결함형급과량표체균주대우불동삼투압화배양온도적내수성급해조건하각균주포내해조당적함량.결과표명:불동배양조건하,Corynebacterium glutamicum(△otsAB)포내해조당함량여동조건야생형상비감소료34.40%～44.96%,대우삼투압화온도적내수성명현강저;재상동적배양온도(30℃)、불동적삼투압조건하,Corynebacterium glutami-cum(pECotsAB)포내해조당함량여야생형상비증가료14.53%～34.5%;세포대우온도화삼투압적내수성수포내해조당함량적증가이제고.