蚌埠医学院学报
蚌埠醫學院學報
방부의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE BENGBU
2012年
2期
145-147,150
,共4页
朱晓骏%孙学华%刘顺庆%高月求
硃曉駿%孫學華%劉順慶%高月求
주효준%손학화%류순경%고월구
基因表达%微管相关蛋白1轻链3B%HepG2.2.15细胞%自噬
基因錶達%微管相關蛋白1輕鏈3B%HepG2.2.15細胞%自噬
기인표체%미관상관단백1경련3B%HepG2.2.15세포%자서
目的:构建人自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3B (microtubule-associated protein 1 light chain 3B,MAP1LC3B)真核表达栽体,并鉴定其生物学功能.方法:通过RT-PCR方法扩增得到人MAP1LC3B cDNA;应用基因重组技术构建pEGFP-N1-LC3B真核表达载体,通过酶切和测序进行鉴定;倒置荧光显微镜下观察EBBS诱导4 h后pEGFP-N1-LC3B表达载体转染的HepG2.2.15细胞质中GFP-LC3B分布的变化.结果:通过测序鉴定,pEGFP-N1-LC3B真核表达载体序列正确,编码框正确;转染后的HepG2.2.15细胞经EBBS诱导4 h后,倒置荧光显微镜检测发现GFP-LC3B由散在分布向点状分布改变.结论:成功构建了人自噬相关基因LC3B真核表达载体,为进一步研究自噬在乙型肝炎病毒中的作用机制奠定了基础.
目的:構建人自噬相關基因微管相關蛋白1輕鏈3B (microtubule-associated protein 1 light chain 3B,MAP1LC3B)真覈錶達栽體,併鑒定其生物學功能.方法:通過RT-PCR方法擴增得到人MAP1LC3B cDNA;應用基因重組技術構建pEGFP-N1-LC3B真覈錶達載體,通過酶切和測序進行鑒定;倒置熒光顯微鏡下觀察EBBS誘導4 h後pEGFP-N1-LC3B錶達載體轉染的HepG2.2.15細胞質中GFP-LC3B分佈的變化.結果:通過測序鑒定,pEGFP-N1-LC3B真覈錶達載體序列正確,編碼框正確;轉染後的HepG2.2.15細胞經EBBS誘導4 h後,倒置熒光顯微鏡檢測髮現GFP-LC3B由散在分佈嚮點狀分佈改變.結論:成功構建瞭人自噬相關基因LC3B真覈錶達載體,為進一步研究自噬在乙型肝炎病毒中的作用機製奠定瞭基礎.
목적:구건인자서상관기인미관상관단백1경련3B (microtubule-associated protein 1 light chain 3B,MAP1LC3B)진핵표체재체,병감정기생물학공능.방법:통과RT-PCR방법확증득도인MAP1LC3B cDNA;응용기인중조기술구건pEGFP-N1-LC3B진핵표체재체,통과매절화측서진행감정;도치형광현미경하관찰EBBS유도4 h후pEGFP-N1-LC3B표체재체전염적HepG2.2.15세포질중GFP-LC3B분포적변화.결과:통과측서감정,pEGFP-N1-LC3B진핵표체재체서렬정학,편마광정학;전염후적HepG2.2.15세포경EBBS유도4 h후,도치형광현미경검측발현GFP-LC3B유산재분포향점상분포개변.결론:성공구건료인자서상관기인LC3B진핵표체재체,위진일보연구자서재을형간염병독중적작용궤제전정료기출.
