安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
33期
20514-20516,20529
,共4页
PolyⅠ:C%PKR%草鱼%克隆%表达
PolyⅠ:C%PKR%草魚%剋隆%錶達
PolyⅠ:C%PKR%초어%극륭%표체
[目的]克隆草鱼的PKR基因,为草鱼抗病毒基因研究奠定基础.[方法]依据GenBank上斑马鱼(AJ852023.1)和鲫鱼(AY293929.1)的PKR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计了3对简并引物；采用100 μg/ml Polyl:C体外分别处理草鱼肾细胞(Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK)12、36、48h,并提取处理后细胞的总RNA,逆转录后用降落PCR方法扩增这3个处理时间细胞中PKR基因.[结果]处理12h时未扩增出PKR基因,处理36和48h时都扩增到了PKR基因,并且表达量随处理时间的增加有所升高,扩增到的部分序列与鲫鱼和斑马鱼的该段序列同源性分别为100.00％和81.48％.[结论]试验成功获得了草鱼PKR基因的部分序列,Polyl:C高效诱导草鱼PKR蛋白表达将有助于开创治疗草鱼类病毒病的一种新思路.
[目的]剋隆草魚的PKR基因,為草魚抗病毒基因研究奠定基礎.[方法]依據GenBank上斑馬魚(AJ852023.1)和鯽魚(AY293929.1)的PKR基因序列,利用Primer Premier 5.0軟件設計瞭3對簡併引物；採用100 μg/ml Polyl:C體外分彆處理草魚腎細胞(Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK)12、36、48h,併提取處理後細胞的總RNA,逆轉錄後用降落PCR方法擴增這3箇處理時間細胞中PKR基因.[結果]處理12h時未擴增齣PKR基因,處理36和48h時都擴增到瞭PKR基因,併且錶達量隨處理時間的增加有所升高,擴增到的部分序列與鯽魚和斑馬魚的該段序列同源性分彆為100.00％和81.48％.[結論]試驗成功穫得瞭草魚PKR基因的部分序列,Polyl:C高效誘導草魚PKR蛋白錶達將有助于開創治療草魚類病毒病的一種新思路.
[목적]극륭초어적PKR기인,위초어항병독기인연구전정기출.[방법]의거GenBank상반마어(AJ852023.1)화즉어(AY293929.1)적PKR기인서렬,이용Primer Premier 5.0연건설계료3대간병인물；채용100 μg/ml Polyl:C체외분별처리초어신세포(Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK)12、36、48h,병제취처리후세포적총RNA,역전록후용강락PCR방법확증저3개처리시간세포중PKR기인.[결과]처리12h시미확증출PKR기인,처리36화48h시도확증도료PKR기인,병차표체량수처리시간적증가유소승고,확증도적부분서렬여즉어화반마어적해단서렬동원성분별위100.00％화81.48％.[결론]시험성공획득료초어PKR기인적부분서렬,Polyl:C고효유도초어PKR단백표체장유조우개창치료초어류병독병적일충신사로.
