CAJ | 학술논문

目的:合成可降解性叶酸(FA)-PEG-PEI和PEG-PEI并研究其负载质粒DNA的能力,比较所形成纳米材料/DNA复合物在体外对细胞的毒性大小及其转染效率,为进一步体内基因治疗做好准备.方法:化学方法合成可降解性FA-PEG-PEI和PEG-PEI,检测所形成纳米材料/DNA复合物的粒径、zeta-电位和凝胶阻滞能力,以及对C6(叶酸受体中度表达)、293T(叶酸高度表达)和HepG2(叶酸不表达)3种细胞的细胞毒性,并对3种细胞进行转染,分别用流式细胞仪、荧光素酶基因表达水平和倒置荧光显微镜检测转染效果.结果:FA-PEG-PEl与PEG-PEI复合pDNA后进行电位、粒度分析表明其带正电,粒径在200～300nm,FA-PEG-PEI和DNA的完全结合在N/P比为5,PEI和PEG-PEI与DNA的完全结合则出现在N/P比为10.M1TT怯证实了复合物在c6、293T、HepG23种细胞中的细胞毒性表明其细胞毒性比常用的PEI 25ku低;在3种细胞中,转染效率从整体来看,N/PtL=15时,FA-PEG-PEI萤光素酶基因表达水平最高;类似的,通过流式细胞仪和倒置荧光显微镜更直观的检测了转染效果,表明FA-PEG-PEI对C6、293T细胞都有靶向效果且在N/P比为15时靶向效果最好,而在HepG2细胞中没有靶向效果.结论:此研究结果为叶酸靶向基因治疗神经胶质瘤寻找行之有效的基凶载体提供了理论和实践基础,可进一步于动物体内进行联合基因治疗神经胶质瘤.
목적:합성가강해성협산(FA)-PEG-PEI화PEG-PEI병연구기부재질립DNA적능력,비교소형성납미재료/DNA복합물재체외대세포적독성대소급기전염효솔,위진일보체내기인치료주호준비.방법:화학방법합성가강해성FA-PEG-PEI화PEG-PEI,검측소형성납미재료/DNA복합물적립경、zeta-전위화응효조체능력,이급대C6(협산수체중도표체)、293T(협산고도표체)화HepG2(협산불표체)3충세포적세포독성,병대3충세포진행전염,분별용류식세포의、형광소매기인표체수평화도치형광현미경검측전염효과.결과:FA-PEG-PEl여PEG-PEI복합pDNA후진행전위、립도분석표명기대정전,립경재200～300nm,FA-PEG-PEI화DNA적완전결합재N/P비위5,PEI화PEG-PEI여DNA적완전결합칙출현재N/P비위10.M1TT겁증실료복합물재c6、293T、HepG23충세포중적세포독성표명기세포독성비상용적PEI 25ku저;재3충세포중,전염효솔종정체래간,N/PtL=15시,FA-PEG-PEI형광소매기인표체수평최고;유사적,통과류식세포의화도치형광현미경경직관적검측료전염효과,표명FA-PEG-PEI대C6、293T세포도유파향효과차재N/P비위15시파향효과최호,이재HepG2세포중몰유파향효과.결론:차연구결과위협산파향기인치료신경효질류심조행지유효적기흉재체제공료이론화실천기출,가진일보우동물체내진행연합기인치료신경효질류.