CAJ | 학술논문

TMSG-1是用mRNA差异显示技术克隆的转移相关基因,它在高转移肿瘤细胞系和有转移的肿瘤组织中表达下降.以高转移的前列腺癌细胞系PC-3M-1E8为受体细胞,通过基因转染技术观察了TMSG-1基因表达对细胞V-ATPase活性、细胞内pH值和细胞凋亡情况的影响,同时利用GFP对TMSG-1细胞内定位进行了分析.结果表明,V-ATPase在PC-3M-1E8细胞系,转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系的活性无明显差异.在转染正义TMSG-1的细胞系中,V-ATPase的活性比PC-3M-1E8细胞系,转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系均有明显增高(P＜0.001).利用pH敏感性荧光探针BCECF测定细胞内的pH值,结果显示转染正义TMSG-1组的pHi值有明显提高.细胞凋亡的检测结果表明,转染正义TMSG-1组细胞凋亡明显增多(P＜0.01),BCL2的表达显著下降.TMSG-1蛋白的细胞内定位分析表明,TMSG-1是一个跨膜蛋白,定位于内质网、线粒体等细胞质膜系统.实验结果表明,前列腺癌细胞系中TMSG-1的上调可以提高细胞V-ATPase的活性,增加细胞内的pH值,同时TMSG-1的上调还可抑制BCL2的表达,促进细胞凋亡的发生.
TMSG-1시용mRNA차이현시기술극륭적전이상관기인,타재고전이종류세포계화유전이적종류조직중표체하강.이고전이적전렬선암세포계PC-3M-1E8위수체세포,통과기인전염기술관찰료TMSG-1기인표체대세포V-ATPase활성、세포내pH치화세포조망정황적영향,동시이용GFP대TMSG-1세포내정위진행료분석.결과표명,V-ATPase재PC-3M-1E8세포계,전염공재체화전염반의TMSG-1세포계적활성무명현차이.재전염정의TMSG-1적세포계중,V-ATPase적활성비PC-3M-1E8세포계,전염공재체화전염반의TMSG-1세포계균유명현증고(P＜0.001).이용pH민감성형광탐침BCECF측정세포내적pH치,결과현시전염정의TMSG-1조적pHi치유명현제고.세포조망적검측결과표명,전염정의TMSG-1조세포조망명현증다(P＜0.01),BCL2적표체현저하강.TMSG-1단백적세포내정위분석표명,TMSG-1시일개과막단백,정위우내질망、선립체등세포질막계통.실험결과표명,전렬선암세포계중TMSG-1적상조가이제고세포V-ATPase적활성,증가세포내적pH치,동시TMSG-1적상조환가억제BCL2적표체,촉진세포조망적발생.