生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
1期
36-41
,共6页
邓燕杰%张淑兰%尚曦莹%付攀峰%崔秀云
鄧燕傑%張淑蘭%尚晞瑩%付攀峰%崔秀雲
산연걸%장숙란%상희형%부반봉%최수운
人脐血CD34+细胞%hRI基因%转染%表达%肿瘤
人臍血CD34+細胞%hRI基因%轉染%錶達%腫瘤
인제혈CD34+세포%hRI기인%전염%표체%종류
探讨人核糖核酸抑制因子(hRI)基因在人脐血干细胞中的转染及表达情况,及转染后对小鼠B16黑色素瘤生长的影响.用免疫磁珠分离系统(MACS)分离纯化人脐血CD34+细胞后,用制备的含hRI基因的逆转录病毒上清转染脐血CD34+细胞,采用克隆形成法和PCR法检测转染效率,Western-blot和免疫荧光法检测基因表达,同时观察RI对荷瘤C57BL小鼠B16黑色素瘤生长的影响.应用MACS能高度纯化人脐血CD34+细胞,使分选后的脐血CD34+细胞纯度平均达96.15%.hRI基因能够转染到脐血CD34+细胞上,转染效率达35%,Western-blot和免疫荧光检测转染后CD34+细胞hRI基因有阳性表达.经转hRI CD34+细胞治疗,使小鼠B16黑色素瘤的生长速度减慢,成瘤率和瘤重降低,成瘤潜伏期延长.
探討人覈糖覈痠抑製因子(hRI)基因在人臍血榦細胞中的轉染及錶達情況,及轉染後對小鼠B16黑色素瘤生長的影響.用免疫磁珠分離繫統(MACS)分離純化人臍血CD34+細胞後,用製備的含hRI基因的逆轉錄病毒上清轉染臍血CD34+細胞,採用剋隆形成法和PCR法檢測轉染效率,Western-blot和免疫熒光法檢測基因錶達,同時觀察RI對荷瘤C57BL小鼠B16黑色素瘤生長的影響.應用MACS能高度純化人臍血CD34+細胞,使分選後的臍血CD34+細胞純度平均達96.15%.hRI基因能夠轉染到臍血CD34+細胞上,轉染效率達35%,Western-blot和免疫熒光檢測轉染後CD34+細胞hRI基因有暘性錶達.經轉hRI CD34+細胞治療,使小鼠B16黑色素瘤的生長速度減慢,成瘤率和瘤重降低,成瘤潛伏期延長.
탐토인핵당핵산억제인자(hRI)기인재인제혈간세포중적전염급표체정황,급전염후대소서B16흑색소류생장적영향.용면역자주분리계통(MACS)분리순화인제혈CD34+세포후,용제비적함hRI기인적역전록병독상청전염제혈CD34+세포,채용극륭형성법화PCR법검측전염효솔,Western-blot화면역형광법검측기인표체,동시관찰RI대하류C57BL소서B16흑색소류생장적영향.응용MACS능고도순화인제혈CD34+세포,사분선후적제혈CD34+세포순도평균체96.15%.hRI기인능구전염도제혈CD34+세포상,전염효솔체35%,Western-blot화면역형광검측전염후CD34+세포hRI기인유양성표체.경전hRI CD34+세포치료,사소서B16흑색소류적생장속도감만,성류솔화류중강저,성류잠복기연장.
